目的：燕窝是一种宜药宜膳的珍贵药材,市场需求巨大,物稀价昂必导致伪劣产品充斥市场,故急需对其产品质量、产地等进行规范。燕窝主要由唾液酸糖蛋白组成,其水提液中发现多种水溶性蛋白,前期研究亦发现通过等电聚焦电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳可以揭示不同品种燕窝及其伪品的差异,故电泳技术是分析燕窝蛋白质的一种理想方法。考查影响燕窝蛋白质提取率和降解程度的因素,以蛋白质含量和电泳图谱为依据,摸索适合电泳的最佳提取条件。改善现有的SDS-PAGE技术,分析不同品种燕窝及其伪品的电泳条带进行真伪鉴别,探讨燕窝质量与产地、自然环境和加工过程等因素之间的关系。摸索能够有效分离燕窝蛋白质的双向电泳条件,寻找不同正品燕窝间有表达差异的蛋白点,对其进行初步比对。方法：采用单因素实验,以蛋白质含量和电泳图谱为考查依据,研究料液比、提取时间、提取温度和不同配方提取液对燕窝蛋白质提取率的影响。考查不同凝胶制备和染色方法对电泳图谱辨识度和特征性蛋白的影响,再利用优化的SDS-PAGE对不同商品规格的燕窝正品和伪品进行电泳图谱比较,从而达到鉴别的目的。通过对双向电泳技术的适当改进,如蛋白质除杂、搭盐桥除去离子等,对燕窝蛋白质双向电泳技术进行优化。结果：最佳提取工艺条件为,水提取料液比1：45,提取温度70℃,提取时间3h；或用含7M尿素／2M硫脲、1M Tris(pH8.8)的裂解液室温放置1h提取燕窝蛋白质。此外研磨、超声对提取燕窝蛋白质并没有帮助,硫酸铵可以沉淀燕窝蛋白质,但残留的盐离子形成大量纵条纹,影响了电泳图谱的清晰度。用Bradford法试剂盒测定燕窝蛋白质浓度,操作过程相对简单省时,精密度、稳定性均相对较理想。用苯酚-浓硫酸法测定燕窝单糖、低聚糖和总多糖含量,不同品种燕窝显示出一定的差异,但不足以作为鉴别依据。聚丙烯酰胺凝胶电泳最佳条件为：10%分离胶、6%浓缩胶、上样量15gL、Tricine-SDS电泳系统、考马斯亮蓝-银复染色法和高碘酸-Schiff试剂染色法,九种正品燕窝样品在SDS—PAGE图谱上可见明显差异,与明胶、银耳和猪皮三种常见伪品比较可见特征性蛋白条带,通过糖蛋白染色可以清楚地区分正品和伪品。用离心柱对燕窝蛋白质进行浓缩和除杂,再通过滤纸片搭建盐桥,延长除盐时间等技术改进,缩短了双向电泳时间,提高了电泳图谱的蛋白质点数目与分辨率。讨论：用优化的提取工艺可以得到浓度较高、降解程度较低的燕窝蛋白质提取液。SDS—PAGE可获得燕窝蛋白质的特征性电泳图谱,用于鉴别不同品种燕窝及其常见伪品是可行的。方法准确、可靠、重复性较好,可为同类药材及其制剂的生产、质量控制提供参考。优化了适合燕窝样品的双向电泳法,为以后进一步分离燕窝蛋白质打下基础。