脂联素对足细胞凋亡的影响及其机制研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:JK0803_zhoukaijun
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目的:本课题的目的是为了研究在高糖或PAN条件下,脂联素是否会影响足细胞的凋亡。方法:将培养的足细胞分别分成以下几组:(1)正常糖浓度对照组(5.5mmol/L);(2)高糖组(30mmol/L);(3)高糖30mmol/L+脂联素(2.5ug/ml);(4)PAN组(50mg/L);(5)PAN+脂联素组(2.5ug/ml),分别干预12h、24h、48h之后通过AnnexinV/PI法和原位末端标记法(TUNEL)法检测各组足细胞凋亡率,通过RealtimePCR实时荧光定量检测调控凋亡相关蛋白基因bax、bcl-2、caspase3等mRNA量的变化,最后运用western-blot检测凋亡相关蛋白Bax、Caspase3等表达量的变化。结果:(1)AnnexinV/PI和TUNEL法测定的足细胞凋亡率:高糖组足细胞凋亡率高于正常糖组而低于高糖+脂联素组,PAN组足细胞凋亡率高于正常糖组而低于PAN+脂联素组,;(2)荧光实时定量PCR测定Bax、Bcl-2、caspase3等mRNA量的变化:高糖组Bax、bcl-2和caspase3mRNA表达量高于正常糖组和高糖+脂联素组,PAN组Bax、bcl-2和caspase3mRNA表达量高于正常糖组和PAN+脂联素组;(3)western-blot检测凋亡相关蛋白Bax、Caspase3等表达量:高糖组Bax和Caspase3蛋白表达量高于正常糖组和高糖+脂联素组,PAN组Bax和Caspase3表达量高于正常糖组和PAN+脂联素组。结论:在高糖或PAN环境下,在添加脂联素之后足细胞凋亡率有所降低,并且检测到凋亡相关蛋白基因Bax、bcl-2和caspase3的mRNA表达量降低,添加脂联素组凋亡相关蛋白Bax和caspase表达量明显高于未添加脂联素组,说明脂联素能够抑制足细胞的凋亡。
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