阪崎克罗诺杆菌类脂A酰基脂肪酸链转移酶的基因鉴定及功能研究

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:andychinajj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
阪崎克罗诺杆菌(Cronobacter sakazakii)是一种在自然界广泛存在的食源性致病菌,它的主要污染食品为婴儿配方奶粉。阪崎克罗诺杆菌能感染婴儿和新生儿,导致脑膜炎、败血病、菌血症、坏死性小肠结膜炎,但是其致病机理还不十分清楚。近些年研究表明,有些革兰氏阴性细菌的致病能力与其外膜类脂A的分子结构密切相关,但是阪崎克罗诺杆菌的类脂A分子结构及其合成途径还有待研究。本课题在前期研究的基础上,进一步确定了阪崎克罗诺杆菌类脂A分子结构与大肠杆菌不同,主要表现在其次级脂肪酸链长度上。针对其分子结构的特点,本课题鉴定了与阪崎克罗诺杆菌类脂A次级脂肪酸链相关的三个基因ESA02293,ESA02951和ESA01386。具体研究内容与结论如下:(1)通过基因组同源比对,发现C. sakazakii BAA-894的三个基因ESA02293、ESA02951和ESA01386与Escharicha coli W3110的次级脂肪酸链转移酶的编码基因lpxL、lpxP、lpxM的同源性分别为79%、71%、75%。(2)通过将ESA02293在类脂A突变株E. coli MKV15b和MLK1067里表达,发现其编码的蛋白可以将C14:0酰基脂肪酸链转移到类脂A分子的2′位上,确定其功能与LpxL相似,因而将其命名为CslpxL。(3)通过将ESA02951在E. coli MKV15b和MLK1067里表达,发现其编码的蛋白可以将C16:1或C14:0酰基脂肪酸链转移到类脂A分子的2′位上。在12°C和37°C培养时主要产物都是含有C16:1的类脂A,在12°C时尤其显著。因其功能与LpxP接近,因而将ESA02951命名为CslpxP。(4)通过将ESA01386在E. coli MKV15b里表达,发现其编码的蛋白不能以四条链的类脂A为底物;通过将ESA01386在E. coli MLK1067里表达,发现其编码的蛋白可以将C14:0或C12:0酰基脂肪酸链转移到类脂A分子的3′位上。因其功能与LpxM接近,因而将ESA01386命名为CslpxM。(5)通过将四个基因CslpxL、CslpxM、EclpxL和EclpxM在E. coli MKV15b里共表达,分析其类脂A分子结构,进一步确认CsLpxM可以将C14:0或C12:0酰基脂肪酸链转移到类脂A分子的3′位上。(6)类脂A脂肪酸链的数目能一定意义上影响到细胞表面疏水性,自凝集及菌膜形成能力。综上所述,本研究结合基因表达和质谱分析,确定了阪崎克罗诺杆菌类脂A合成相关的三个关键基因ESA02293、ESA02951和ESA01386的功能,解释了阪崎克罗诺杆菌中类脂A分子结构的多样性。
其他文献
目的探讨原发性高血压与良性前列腺增生(BPH)发生与进展的相关性。方法对临床诊断为BPH,因重度下尿路梗阻接受手术治疗,术后病理证实为BPH的423例患者的临床资料进行分组对比
国家级名老中医赵绍琴对现代医学中肾系慢性疾病的中医治疗有深入研究,对中西医学关于慢性肾病的传统观点提出质疑,并针对性地提出一系列创新理论,认为慢性肾病并非单纯属虚,
从优化产品设计过程和提高企业的市场响应能力出发 ,综合运用机械产品智能化设计技术、经营决策支持理论 ,对机械产品智能化设计与经营决策集成方法进行了探讨和研究。建立了
本文讨论了高校学风建设和学生工作在高校教育工作中的基础作用及其相互间的关系 ,并就高校学生工作在学风建设中发挥作用进行了有益的探讨
<正>从六十年代以来,美国心理学思潮经历了一场巨大的变化。它的标志是行为主义的没落和认知心理学的兴起。如果说,本世纪初行为主义的出现,是美国现代心理学发展史上第一次巨大
轻型井点降水法作为保持基坑坑底和边坡稳定的一种关键手段,已越来越受到重视。结合江苏省泰州市远东大道污水管道基坑开挖施工现场情况,确定试验段深基坑轻型井点降水方案,
从三个角度对教师的教学能力进行了论述: (1) 教学能力的性质。认为教学活动是科学与艺术的统一, 而教学能力是一般能力与特殊能力的结合; (2) 教学能力的构成。在理论工作者与实践者
<正>道家思想起源于上古时期,作为道家学派的创始人,老子是最早质疑宗教,反对迷信的人。在道教中,"道法自然"是一种基本的行为准则,被广泛应用于修炼成仙、为人处事乃至治理
目的:观察五根一皮汤对变应性血管炎的治疗效果。方法:对46例变应性血管炎患者予五根一皮汤内服治疗,观察其疗效并对出院患者进行随访观察总结。结果:46例患者临床治愈38例(8
热压Ag-Cu复合材料的界面层两侧各为含Ag的Cu基固溶体和含Cu的Ag基固溶体。界面两侧的结合是固溶体间的金属结合,界面强度比纯Ag的强度略高,而比纯Cu的强度低。本文用X射线方