我们将来源于深海古菌Aeropyrum pernix K1的嗜热脂肪酶APE1547基因在E. coli BL21 (DE3)中克隆并表达。该重组嗜热脂肪酶是重要的工业酶制剂品种之一,可以催化解脂、酯交换、酯合成等反应,广泛应用于油脂加工、食品、医药、日化等工业。本文对该工程菌的发酵条件进行了系统的研究。考察了大肠杆菌在摇瓶中表达该酶的基本条件包括温度、pH值、DO值、质粒稳定性、诱导剂和诱导时机等;利用生物统计学方法优化了以玉米浆为发酵基质的大肠杆菌培养基组成,达到了国产蛋白胨,酵母粉培养基的水平。我们使用玉米浆培养基在发酵罐中对该工程菌进行高密度发酵,建立了指数流加葡萄糖实现高密度发酵和高浓度乳糖诱导表达嗜热脂肪酶的发酵生产工艺,并用1吨发酵罐进行了中试实验;根据嗜热脂肪酶耐高温的特点,在产物后处理过程中创造性地提出了加热破碎法,在大肠杆菌破碎的同时,嗜热脂肪酶被纯化,经过冷冻干燥制备出不同纯度的嗜热脂肪酶制剂样品。在本研究中我们应用生物统计学方法确立了以玉米浆为主的发酵基质;确立了一个从小规模到中试规模的发酵生产重组嗜热脂肪酶的方法;建立了适合于嗜热脂肪酶生产的后处理工艺。我们系统地优化了整个发酵过程,为下一步的大规模工业生产搭建了新的平台。