目的：胃癌位居全球恶性肿瘤死亡原因的第二位,是最常见的消化道恶性肿瘤之一。近年来，在大多数发达国家随着生活方式的改变胃癌的发病率有所下降，但与胃癌和食管癌的发病率逐年下降相比较,胃食管交界部腺癌的发病率显著上升。本实验室前期对河北省食管癌高发区磁县和胃癌高发区赞皇县贲门癌发病率的调查研究也得出了相似的结论,但对这一现象及贲门癌发病机制的探索目前仍然处于初级阶段。肿瘤的发生、发展是多因素相互作用的结果。pim家族是新近发现的一组编码丝/苏氨酸蛋白激酶的原癌基因，可通过促进细胞周期进程和抑制凋亡来调控肿瘤的发生发展。pim家族由pim-1、pim-2、pim-3组成，它们广泛分布于人体各组织器官，对正常生长发育、分化、成熟起重要作用。目前，人们对pim-1和pim-2的探索研究已经取得了不少进展，但对新成员pim-3研究相对较少。pim-3与pim-1及pim-2的序列相似性分别为57.1%和44.0%，在功能上也颇为相似，均能磷酸化众多特异性底物，在细胞周期及细胞凋亡进程中发挥重要调控作用。另外，有研究表明许多恶性肿瘤的发生与pim-3表达上调密切相关。与pim家族其他成员一样，pim-3在转录和转录后水平下调p27^kip1的表达。CDK抑制因子p27^kip1已被公认是一种新的pim激酶调节因子, p27^kip1是细胞周期G1/S期转换的关键分子,多种类型的肿瘤及肿瘤相关进程都与p27^kip1表达下调密切相关。有文献报道，5%的p27^kip1表达下调是由于蛋白水解，而p27^kip1稳定性的调节是主要是通过其磷酸化形式而改变的，最终导致p27^kip1由核移位到胞浆并推进细胞周期进入到S期。Ser10是p27^kip1最主要的磷酸化位点（phosphated Ser10p27^kip1），占据了总磷酸化位点的70%。pim-1可以调控myc基因，pim-1和pim-2在丝/苏氨酸位点磷酸化c-myc蛋白，从而在c-myc的转录活动中提高其稳定性。另外，pim-3通过激活PGC-1a提高c-myc mRNA表达，因此，pim激酶通过调节c-myc的活性参与肿瘤的发生发展过程。细胞增殖依靠细胞周期的正常运转，通过G₁、S、G₂和M期的依次推进完成细胞周期进程。细胞周期调控点在细胞周期进程中发挥至关重要的作用，调控G₂/M期转换的cdc2（cyclin-dependent kinase1）被认为是最重要的调控蛋白之一，它与cdc25c相互作用，使细胞周期顺利进入M期。有文献报道，pim-1在G₂/M转换期对cdc25c的调节有两条途径，第一，pim-1直接磷酸化cdc25c；第二，pim-1通过磷酸化作用锁定cdc25c的抑制因子C-TAK1,使其不能发挥对cdc25c的抑制作用。人类pim-3与pim-1的序列相似性为57.1%，功能上也颇为相似，故可以推断，pim-3同样通过直接或间接对cdc25c的调控作用来促进细胞周期进程。所以我们选择pim-3、p-p27（phosphated Ser10p27^kip1）、c-myc、cdc2及cdc25c五个因子来进行研究，其在贲门癌及远端胃癌的对比研究尚未见报道。研究发现，贲门癌和其他部位的胃癌相比，肿瘤表现出更为活跃的生物学行为，如浸润程度更深、更易发生淋巴结转移及预后不良。有学者提出，贲门癌可能是胃癌中的一种独特亚型。因此，全面了解贲门癌的病因、发病机制、免疫表型和生物学行为对于预防、早期诊断和综合治疗贲门癌是尤为重要的。但目前我国有关对比研究贲门癌和远端胃癌的发病机制、分子遗传学等方面的差异尚处于初期，尚不清楚贲门癌发病率较远端胃癌逐年增高的原因，对比研究不同部位胃腺癌基因表达的差异有助于进一步揭示贲门癌的发病机制。本研究采用免疫组化学方法检测pim-3、p-p27（phosphated Ser10P27^kip1）、c-myc、cdc2和cdc25c在贲门癌和远端胃癌中的表达情况，探讨其在贲门腺癌及远端胃腺癌中病理意义的差异，对比研究两部位肿瘤在发病机制及免疫表型方面可能存在的差异。方法：采用免疫组织化学SP法，对比分析78例贲门癌和62例远端胃癌pim-3、p-p27、c-myc、cdc2和cdc25c的表达情况，探讨其与临床病理特征的相关性及五者之间的相互作用关系，20例正常胃黏膜作为对照。统计分析运用SPSS17.0软件，数据采用χ2检验、Fisher确切概率法及相关分析等方法进行统计分析。结果：1pim-3蛋白表达及临床病理意义1.1贲门癌和远端胃癌pim-3蛋白的表达情况pim-3蛋白阳性反应定位于细胞质，呈棕黄色颗粒。20例正常胃黏膜中有4例呈阳性表达，阳性表达率为20.0%。78例贲门癌和62例远端胃癌中pim-3阳性表达均为50例，阳性表达率分别为64.1%和80.6%，均明显高于正常胃黏膜（P<0.05）。贲门癌pim-3阳性表达率明显低于远端胃癌（64.1%vs80.6%，P<0.05）。1.2pim-3蛋白在贲门癌和远端胃癌表达的临床病理意义比较pim-3在贲门癌高-中分化组的阳性表达率为38.5%，明显低于低分化组（76.9%，P<0.05）。T1/T2分期组中pim-3的阳性率为48.5%，明显低于T3/T4分期组（75.6%，P<0.05），但其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小及淋巴结转移均无关（P>0.05）。pim-3蛋白在远端胃癌的阳性表达分别与患者的分化程度、肿瘤分期、淋巴结转移相关（高/中分化：56.3%vs低分化：89.1%；肿瘤分期T1/T2:65.5%vs T3/T4:94.0%;淋巴结转移阴性：60.0%vs阳性：94.6%，P<0.05）；但与年龄、性别、肿瘤大小均无关（P>0.05）。研究结果提示，贲门癌和远端胃癌pim-3的过表达参与了肿瘤的发生，但其临床病理意义存在异同。pim-3过表达与贲门癌的淋巴结转移无关，而与远端胃癌的淋巴结转移密切相关。pim-3过表达与两部位肿瘤的分化程度及肿瘤分期显著相关，都表现为分化越低、分期越晚，pim-3表达越高。2p-p27蛋白表达及临床病理意义2.1贲门癌和远端胃癌p-p27蛋白表达情况p-p27蛋白阳性反应定位于细胞核和/或细胞质。p-p27在贲门癌组阳性表达率为42.3%，在远端胃癌组的阳性表达率为61.3%，均明显高于正常胃黏膜对照组（5.0%，P<0.05）。贲门癌中p-p27阳性表达率明显低于远端胃癌（P<0.05）。2.2p-p27蛋白在贲门癌和远端胃癌表达的临床病理意义比较。p-p27蛋白在贲门癌组的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移均无相关关系（P>0.05）。p-p27蛋白在远端胃癌组的表达与肿瘤分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移显著相关。低分化组（69.6%）明显高于高/中分化组（37.5%，P<0.05）；T3/T4分期组（78.8%）明显高于T1/T2分期组（41.4%，P<0.05），无淋巴结转移组（44.0%）明显低于伴淋巴结转移组（73.0%，P<0.05），但其表达与患者年龄、性别、肿瘤大小均无关（P>0.05）。研究结果提示，贲门癌和远端胃癌p-p27蛋白均有不同程度的过表达，而且远端胃癌更明显。p-p27的表达与贲门癌的各项病理参数均无相关性，而与远端胃癌的分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移显著相关。3c-myc蛋白表达及临床病理意义3.1贲门癌和远端胃癌c-myc蛋白的表达情况c-myc蛋白阳性反应定位于细胞核和/或细胞质。78例贲门癌中有33例阳性表达，阳性表达率为42.3%，62例远端胃癌中有41例阳性表达，阳性表达率为66.1%，两者均显著高于正常胃黏膜组（15.0%, P<0.05）,贲门癌组c-myc阳性表达率明显低于远端胃癌组（P<0.05）。3.2c-myc蛋白在贲门癌和远端胃癌表达的临床病理意义比较c-myc蛋白在贲门癌组的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移均无相关关系（P>0.05）。c-myc蛋白在远端胃癌T3/T4分期组的阳性表达率显著高于T1/T2分期组（84.8%vs44.8%，P<0.05）。无淋巴结转移组c-myc阳性表达率显著低于伴淋巴结转移组（48.0%vs78.4%，P<0.05），但其表达与患者年龄、性别及肿瘤大小均无相关性（P>0.05）。研究结果提示，c-myc蛋白在远端胃癌中的表达与肿瘤分期和淋巴结转移显著相关，而贲门癌c-myc的表达与其均无相关性。4cdc2蛋白表达及临床病理意义4.1贲门癌和远端胃癌cdc2蛋白的表达情况cdc2蛋白阳性反应定位于细胞核。正常胃黏膜阳性率为25.0%。贲门癌组阳性表达率为74.4%，远端胃癌组cdc2蛋白的阳性表达率为72.6%，两组阳性率均明显高于正常胃黏膜组（25.0%, P<0.05）。贲门癌与远端胃癌cdc2阳性表达率无明显差异（P>0.05）。4.2cdc2蛋白在贲门癌和远端胃癌表达的临床病理意义比较cdc2蛋白在贲门癌组和远端胃癌组的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移均无相关关系（P>0.05）。5cdc25c蛋白表达及临床病理意义5.1贲门癌和远端胃癌cdc25c蛋白的表达情况cdc25c蛋白阳性反应定位于细胞核，正常胃黏膜阳性表达率为30.0%。贲门癌组及远端胃癌组cdc25c蛋白阳性表达率分别为85.9%和74.2%，均明显高于正常黏膜组（30%, P<0.05），但两者之间差异无统计学意义（P>0.05）。5.2cdc25c蛋白在贲门癌和远端胃癌中表达的临床病理意义cdc25c蛋白在贲门癌组和远端胃癌组的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移均无相关关系（P>0.05）。6贲门癌和远端胃癌pim-3、p-p27、c-myc、cdc2和cdc25c蛋白表达的关系pim-3与p-p27的表达在贲门癌组和远端胃癌组均呈正相关关系（r=0.316，P=0.005；r=0.533，P=0.000）；p-p27与c-myc的表达在贲门癌组和远端胃癌组均呈正相关关系（r=0.370，P=0.001；r=0.481，P=0.000）；c-myc与pim-3的表达在贲门癌组和远端胃癌组均呈正相关关系（r=0.424，P=0.000；r=0.598，P=0.000）结论：1pim-3、p-p27、c-myc、cdc2和cdc25c的过表达参与了贲门癌和远端胃癌的发生。2pim-3、p-p27和c-myc在贲门癌和远端胃癌的表达存在差异，贲门癌中表达较弱，提示pim-3参与调控的p-p27和c-myc在两者中的作用程度并不完全相同，在远端胃癌中的作用更明显。3贲门癌和远端胃癌的cdc2和cdc25c表达未见明显差异，提示两者参与的G2期调控并不完全依赖pim-3，p-p27及c-myc的调节。4远端胃癌中pim-3、p-p27和c-myc表达分别与分化程度、肿瘤分期及淋巴结转移有关，而贲门癌中仅pim-3的表达与分化程度及肿瘤分期有关。5pim-3蛋白表达与贲门癌的淋巴结转移无关，而与远端胃癌的转移密切相关，可作为远端胃癌淋巴结转移风险的预测指标。