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甘油-3-磷酸酰基转移酶(GPAM)是合成甘油三酯的第一步反应的关键酶,对乳脂形成过程具有很大的影响。本实验旨在研究GPAM基因对中国荷斯坦奶牛乳脂水平的影响。在本研究中,先采用PCR-PFLP的方法对GPAM基因遗传多态性进行了检测,进一步分析GPAM基因SNP位点与中国荷斯坦奶牛产奶性状的相关性。实验结果表明:在中国荷斯坦奶牛群体中,检测到了三个SNP位点,分别为E20-3386G>A位点、I18-652A>G位点和I18-726A>G位点。其中,牛GPAM基因E20-3386G>A位点与中国荷斯坦奶牛乳蛋白率及体细胞数呈显著相关性(p<0.05);I18-652A>G位点与中国荷斯坦奶牛乳蛋白、干物质及体细胞数呈显著相关性(p<0.05);I18-726A>G与中国荷斯坦奶牛乳蛋白率、奶量、干物质、体细胞数均呈显著相关性(p<0.05)。其次构建了牛GPAM基因过表达载体及干扰载体,转染奶牛乳腺上皮细胞后,对GPAM基因与脂代谢的相关功能进行验证。实验结果表明:在奶牛乳腺上皮细胞中,牛GPAM基因能调节脂肪代谢信号通路中关键因子AGPAT4基因的m RNA表达水平,当GPAM基因过表达时,AGPAT4基因的m RNA表达水平显著上升;当GPAM基因沉默时,AGPAT4基因的m RNA和蛋白表达水平显著下降。除此之外,牛GPAM基因过表达时,奶牛乳腺上皮细胞中的甘油三酯含量显著上升;牛GPAM基因沉默时,奶牛乳腺上皮细胞中的甘油三酯含量显著下降。实验结果表明:GPAM基因可能在调节动物脂肪代谢中起关键作用。