紫花地丁内生真菌多样性分析及抑菌作用

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内生真菌广泛存在于植物中,可以产生许多新颖的化学物质,具有抗菌、抗肿瘤、抗氧化等功效。紫花地丁为一种常见中草药,具有抗菌消炎等功效。目前关于紫花地丁内生真菌的研究较少,缺乏紫花地丁内生真菌的分布特点及内生真菌代谢产物的研究。本试验从紫花地丁体内分离纯化内生真菌,经过形态学和分子生物学的鉴定,多样性分析及抑菌活性研究,取得以下试验结果:1.本试验从1,532块紫花地丁组织块中共分离出1,058株内生真菌,形态学和5.8S rDNA序列分析,最终鉴定为46株真菌,归为12个属。其中Colletotrichum属为优势属,占总菌数的36.86%,其次为Fusarium属,占25.05%。2.不同组织、不同季节紫花地丁内生真菌种属分布不同。根、叶、茎和种子中分别分离到556、268、173和62株内生真菌,其中根中的优势属为Fusarium属,占43.88%,茎、叶和种子中的优势属为Colletotrichum属,分别为60.69%,54.85%和22.58%。有些真菌具有组织特异性,如只在根中分离出Paramyrothecium属,叶中分离出Glomerella,种子中分离出Leptosphaerulina属真菌。对不同季节的紫花地丁进行内生真菌分离,其中春季分离出188株,夏季分离出462株,秋季分离出408株,这3个季节的优势属均为Colletotrichum属。3.多样性指数中,根中的真菌多样性最多,其次是茎和叶,丰富度最低的为种子。均匀度分析,根、茎和叶内生真菌的分布度相似,为0.95左右,而种子中的分布度最低,为0.79。结合三种多样性分析,夏季的内生真菌多样性最为丰富。均匀度比较,秋季的均匀度最高,为2.07,其次为夏季,春季的均匀度最低,为0.28。4.10株内生真菌的提取物对蜡状芽孢杆菌有抑菌作用,其中VM-32对蜡状芽胞杆菌为高敏;7株真菌的提取物对链球菌有抑菌活性,有3株菌提取物为中敏,其他为低敏;11株菌的提取物对金黄色葡萄球菌有抑菌活性,其中VM-8、VM-28和VM-34为高敏,VM-23和VM-33为中敏,其他6株真菌为低敏。VM-8、VM-9、VM-14、VM-25和VM-33对以上三种菌均有抑菌活性。但是这些内生真菌提取物对大肠埃希菌、沙门氏菌和铜绿假单胞菌三种革兰氏阴性菌没有抑菌活性。
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