金盏银盘化学成分及抗氧化活性研究

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菊科鬼针草属(Bidens.L)植物,广泛分布于亚洲、美洲的热带和亚热带地区,在我国主要分布在华北、华东、华中、华南、西南各省区。本属植物具较高的药用价值,是我国的传统民间草药,均以全草入药,具有清热解毒、散瘀活血的功效,主治上呼吸道感染、咽喉肿痛、急性阑尾炎、急性黄恒性肝炎、胃肠炎、风湿关节疼痛、疟疾等,外用可治疗疮疖、毒蛇咬伤、跌打肿痛等疾病。近年来,国内外学者对多种鬼针草属植物进行了化学成分研究,发现其具有丰富多样的化学物质,主要包括黄酮类、苯丙甙类、聚炔类、甾体类、萜类等。金盏银盘是鬼针草属中的常见种,其药用价值广泛,被认为是一种潜在的保健品,但目前国内外学者对金盏银盘化学成分的分离、鉴定及单体化合物的药理活性研究较少。目的:本研究对金盏银盘的乙醇提取物进行了系统的分离和纯化,并对所得单体化合物进行了结构解析及和活性检测,以期筛选出结构新颖且具有药物活性的单体化合物,为新药研发提供科学基础。方法:以干燥的金盏银盘全草为材料,粉碎后用不同浓度的乙醇(95%,75%,50%)浸泡处理,将浸提液减压蒸馏至无醇味,依次用石油醚、氯仿、正丁醇分相萃取,所得萃取液减压蒸馏浓缩得浸膏。各浸膏用甲醇溶解后,分别用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱以及RP-C18反向硅胶柱色谱初步分离,收集目标组分再经高效液相色谱技术进一步分离纯化。得到的单体化合物采用核磁共振波谱仪、高分辨液质联用仪、紫外光谱、红外光谱仪等鉴定结构。将分离得到的黄酮类化合物,通过DPPH自由基清除方法,进行抗氧化的活性检测。结果:从金盏银盘乙醇提取物中共分离到36种化合物,包括黄酮类18种,有机酸类4种,苯丙素类2种,聚炔类2种,其它种类化合物10种。其中6种化合物首次从鬼针草属中得到,18种化合物首次从金盏银盘中分离得到;共发现4种新结构化合物,分别为:化合物1:4-O-(3"-O-Acetyl-6"-O-p-coumaroyl-β-D-glucopyranosyl)-p-coumaric acid化合物2:4-O-Methyl Okanin 4’-O-β-D-(4",6"-diaceyyl)-glucopyranoside化合物3:2-Furanoctanoic acid,2,5-dihydro-5-oxo-,methyl ester化合物4:ethyl(9Z,11Z)-8-hydroxyheptadeca-9,11-dienoate用DPPH自由基清除法测定分离出的18个黄酮类单体化合物(化合物2、化合物6-22)的抗氧化能力。实验结果表明,化合物11的抗氧化能力最差在1000 ug/m L时,清除率只有8.59%。其它化合物的清除率随着浓度的升高清除能力增大,其中化合物15:okanin 4’-O-β-D(4",6"-diacetyl)-glucopyranoside抗氧化能力与VC相近,EC50值为38.58 ug/m L。样品6、17也表现出较显著的抗氧化活性,EC50值分别为47.58 ug/m L、46.68 ug/m L。结论:1.本研究通过对金盏银盘乙醇提取物进行系统的分离,共鉴定36个化合物的结构。包括18种黄酮类化合物(橙酮类5种,查尔酮类10种,黄酮醇类2种和黄酮类1种),4种有机酸类化合物,2种苯丙甙类化合物,2种聚炔类化合物以及10种其它类化合物。2.从金盏银盘中分离鉴定新结构化合物4个分别是:4-O-(3"-O-Acetyl-6"-O-p-coumaroyl-β-D-glucopyranosyl)-p-coumaric acid,4-O-Methyl Okanin 4’-O-β-D-(4",6"-diaceyyl)-glucopyranoside,2-Furanoctanoicacid,2,5-dihydro-5-oxo-,methyl ester,ethyl(9Z,11Z)-8-hydroxyheptadeca-9,11-dienoate3.金盏银盘富含黄酮类化合物,分离出的18种黄酮类化合物中化合物15:okanin 4’-O-β-D(4",6"-diacetyl)-glucopyranoside具有很强的抗氧化活性,其抗氧化能力与VC相近。
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