青稞散黑穗病拮抗菌LN-176的分离鉴定、发酵条件及发酵产物的初步研究

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从西藏佩古错湖湖边的土壤中分离得到一株对青稞散黑穗病原菌具有较强抑制作用的细菌,根据菌株的形态学特征和生理生化试验,初步鉴定为多粘芽孢杆菌(Bacillus polymyxa),命名为LN-176。菌体呈细杆状,革兰氏染色阳性,染色均匀,具运动性,可形成内生孢子,芽孢囊膨大,芽孢椭圆形,中生到次端生。该菌株在LB培养基上呈白色圆形不透明菌落,直径约1~2mm,菌落边缘不规则,表面干燥。能发酵葡萄糖、木糖、甘露醇产酸并产气,不能发酵阿拉伯糖。能还原硝酸盐,形成二羟基丙酮,但不能利用柠檬酸盐和丙酸盐,对NaCl的耐受量低于5%。根据以上特征,查阅《伯杰细菌鉴定手册》(第九版)可初步将其鉴定为芽孢杆菌属的多粘芽孢杆菌(B.polymyxa),命名为B.polymyxa LN-176。 进一步通过PCR扩增克隆得到LN-176的16S rDNA并测序。将该序列在GenBank中进行同源性比对,所获得的同源序列均为芽孢杆菌属和类芽孢杆菌属的16S rDNA序列,其同源性都在90%以上。与该序列同源性最高的是芽孢杆菌属B.polymyxa,其同源性达100%,与类芽孢杆菌属P.kribbensis、P.azotofixans、P.burgondia、P.peoriae的同源性均为99%。在此基础上将BLAST得到的16S rDNA序列用DNAman软件构建系统发育树。分子鉴定的结果进一步表明LN-176菌株为芽孢杆菌属的多粘芽孢杆菌。 该菌株对多种植物病原菌、部分革兰氏阳性菌及革兰氏阴性菌都有较好的
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