TuMV侵染对不结球白菜光合特性和抗氧化酶代谢的影响及病毒CP和HC-Pro基因的克隆

来源 :南京农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:Kfreshman
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本文进行了不结球白菜芜菁花叶病毒电镜诊断,研究了病毒侵染对不结球白菜光合荧光特性及抗氧化酶的影响,克隆出芜菁花叶病毒的CP和HC-Pro基因,主要内容如下:1.以感病品种矮脚黄和抗病品种短白梗为试验材料,研究了芜菁花叶病毒侵染对不结球白菜光合及荧光特性的影响。结果表明:感染芜菁花叶病毒后,矮脚黄叶绿素的含量,净光合速率(Pn),气孔导度(Gs),胞间CO2浓度(Ci),蒸腾速率(Tr)均显著降低,而短白梗各个参数下降幅度均不显著;两个品种的PS Ⅱ有效光化学量子产量(Fv’/Fm’)和最大光化学量子产量(Fv/Fm)降低幅度较小,矮脚黄的PS Ⅱ实际光化学量子产量((?)PS Ⅱ),表观光合电子传递速率(ETR)和光化学猝灭系数(qP)均显著降低,而短白梗则降幅较小,非光化学猝灭系数(qN)矮脚黄显著升高,而短白梗升高不明显。2.以感病品种矮脚黄和抗病品种短白梗为试验材料,研究了芜菁花叶病毒侵染对不结球白菜抗氧化酶的影响。结果表明:短白梗POD活性迅速提高,而且一直处于较高的水平,矮脚黄POD活性变化缓慢,变幅也较小,水平较低;接种后短白梗CAT活性持续升高,第九天出现峰值后有所降低,但酶活仍高于矮脚黄,矮脚黄变化缓慢,变幅较小,第七天达到峰值后一直处于较低水平;短白梗与矮脚黄相比,SOD酶活升高较快,上升幅度较大,且始终处于一个较高的水平,变化率在第三天和第九天出现峰值。3.从南京江浦农场不结球白菜上获得芜菁花叶病毒分离物NCB,利用RT-PCR法对病毒CP和HC-Pro基因进行PCR扩增,分别得到1kb和1.4kb的两条带,与预期的TuMV CP和HC-Pro基因大小吻合。扩增产物克隆后测序,CP基因序列长度为864个核苷酸,编码288个氨基酸;HC-Pro基因序列长度为1374个核苷酸,编码458个氨基酸。NCB的CP和HC-Pro基因与已报道的TuMV其他分离物的核苷酸序列同源性分别为90%-99%和80%-95%,氨基酸同源性分别为96%-1000%,94%-99%。从CP基因核苷酸序列同源性来看,本分离物与TuMV萝卜属分离物有更近的亲缘关系,而HC-Pro基因核苷酸序列却显示出与萝卜属分离物较远的亲缘关系。
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