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本文以染料活性艳蓝(Remazol Brilliant Blue KN-R, RBBR)模拟染料废水,利用过水解酶原位催化制备过氧乙酸的方法对其进行脱色处理,并对脱色条件进行了优化。同时,采用交联酶聚体技术对过水解酶进行固定化,并用聚乙烯醇进行二次包埋。最后利用固定化酶进行染料RBBR脱色。主要的实验结果如下：1、过水解酶的纯化及酶学性质分析。利用亲和层析柱纯化过水解酶,SDS-PAGE电泳显示为单一条带,其分子量大小为28 kDa,比活力为9.03 U/mg。酶学性质分析表明,该过水解酶最适pH为6.0,最适温度为65℃,在pH 3.0-6.0及温度为30-65℃范围内具有较好的稳定性；其T502h为83.4℃。2、过水解酶催化的脱色反应。利用过水解酶原位催化制备过氧乙酸对染料RBBR进行脱色。在单因子试验的基础上,通过正交优化试验获得最优脱色条件：在5 mL反应体系中,最适pH5.0、酶量20 U/Reaction、乙酸乙酯与过氧化氢的摩尔比40：1、染料浓度80 mg/mL。在最优条件下处理6h后,染料RBBR的脱色率为81.11%,24 h的脱色率为91.96%。将体系放大50倍后(250 mL),24 h染料RBBR的脱色率为84.55%。3、过水解酶的固定化及应用效果评估。首先采用交联酶聚集体技术(CLEAs)对过水解酶进行固定化,然后采用聚乙烯醇对交联过水解酶聚集体进行二次包埋,进行脱色反应。结果表明,当使用60%(v/v)的有机溶剂S2为沉淀剂,且酶与BSA的比率为16：2,交联剂戊二醛的浓度为100mmol/L时,制备得到的过水解酶交联酶聚体(Per-CLEAs)酶活回收率可达79.72%。利用不同浓度的聚乙烯醇(PVA)进行二次包埋固定化,结果发现,当PVA浓度为10%(w/v)时,包埋后的Per-CLEAs形态较好、酶活回收率较高,而且洗涤三次后无明显的酶活泄露。用其对染料RBBR脱色,在维持80%的脱色率的前提下,至少可以进行6次循环。分别利用游离酶、Per-CLEAs以及包埋后的Per-CLEAs催化合成过氧乙酸原位氧化RBBR脱色,处理30 min后,脱色率分别为63.72%、95.98%、83.51%。