【摘 要】
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研究目的建立人胰腺癌细胞5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药株;观察不同放射剂量照射后,耐药株和亲株中胸腺嘧啶磷酸化酶的表达情况;证实低剂量放射可上调胸腺嘧啶磷酸化酶的表达,且使序贯
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研究目的建立人胰腺癌细胞5-氟尿嘧啶（5-FU）耐药株;观察不同放射剂量照射后,耐药株和亲株中胸腺嘧啶磷酸化酶的表达情况;证实低剂量放射可上调胸腺嘧啶磷酸化酶的表达,且使序贯的5-FU对肿瘤细胞产生更强的生长抑制作用。研究方法在体外,反复用5-FU处理AsPC-1后使其获得耐药性。给予耐药株AsPC-15Fures和其亲株不同的放射剂量和/或5-FU干预,利用Wst-1方法检测细胞的增殖情况。为了证明胸腺嘧啶磷酸化酶的表达增加可使胰腺癌细胞化疗增敏,借助蛋白印迹法观察,放射后不同时间点细胞内胸腺嘧啶磷酸化酶的表达变化;将TP siRNA转染胰腺癌细胞,检测在相同的放射、5-FU或联合序贯干预后的变化。结果经5-FU周期性诱导可获得5-FU耐药株,AsPC-1和AsPC5-Fures的5-FUIC50,分别为157.138μM和1173.989μM,具有统计学差异;AsPC5-Fures还具有放射交叉耐受性。与2Gy相比,单独的0.05Gy放射仅轻度抑制5-FU耐药株的生长;给予0.05Gy与5-FU序贯处理后,增强了对5-FU耐药株的生长抑制作用,0.05Gy联合5-FU组较于单独应用5-FU组,AsPC5-Fures的抑制率提高了23.94%;而在2Gy联合5-FU组,抑制率上升了32.62%;与对照组比较,两者的p<0.001。蛋白印迹实验结果提示,上述的增敏现象与胸腺嘧啶磷酸化酶的时间依赖性上调表达有关;借助RNA干扰技术,将人胰腺癌细胞中胸腺嘧啶磷酸化酶的表达关闭,这种增敏现象随即消失。结论通过体外实验,我们发现:0.05Gy,2Gy可以上调AsPC-1及其5-FU耐药株的TP表达水平,且在耐药株中更为明显;通过上调TP的表达,低剂量照射0.05Gy与2Gy一样,可促进5-FU对胰腺肿瘤细胞的杀伤;低剂量照射0.05Gy与常规剂量2Gy一样,可以抑制胰腺肿瘤细胞的生长;AsPC-1株的5-FU耐药性与大剂量放射耐受性有交叉耐受现象。人胰腺腺癌5-FU耐药细胞株可经低剂量放射获得化疗敏感性,这一结果为胰腺癌综合治疗的新策略提供了依据。
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