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戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)是一种单股正链RNA病毒,该病毒经粪-口途径传播,不仅可以感染人,而且有多种动物可以作为其自然宿主,是严重危害人类健康的病毒性肝炎病原体。戊型肝炎(Hepatitis E,HE)在发达国家、发展中国家流行,目前每年有2000万人感染,大约有70万人死亡,且孕妇中致死率高达20%-30%,尤其是晚期孕妇HEV的感染率及孕妇死亡率最高。当病原体入侵时,机体内的免疫系统被激活,补体系统是除免疫球蛋白(Immunoglobulin,Ig)分子之外参与免疫效应的大分子,是先天性和适应性免疫的交汇点,参与病原物的识别和防御,是机体致病性感染的第一线防御。而肝脏是补体合成的主要场所,有关文献记载,肝脏疾病与补体的激活相关,如:(1)肝功失常的肝炎患者血清中发现补体激活;(2)肝炎患者的炎症发展与补体含量变化具有相关性。另有文献指出:某些肝炎病毒可干扰补体系统的激活,从而逃避宿主的免疫系统,使病毒在人体和动物体内可以持续感染,从而造成机体肝组织的损伤,炎症持续恶化甚至会引发癌变。因此,补体系统的激活与病毒的复制有一定的相关性。本研究的主要工作是探究补体与HEV复制的相关性,主要包括3个部分:1、HEV感染激活补体大量表达HEV在孕妇中的复制能力较强,且在前期实验中发现孕妇血清尤其是晚期孕妇血清能够促进HEV的复制,为研究HEV感染孕妇后是否能够刺激补体的激活,我们收集了感染HEV的孕妇及未妊娠期妇女的血清各20份,检测血清中HEV的拷贝数和补体C3、C4、C3aR、CD55和CD59的含量;阴性对照为未感染HEV的孕妇和未妊娠期妇女的血清各20份。结果显示:与HEV感染的未妊娠期妇女相比,HEV感染的孕妇血清中检测到补体C3aR及CD59的显著激活。说明HEV感染能够刺激补体的激活,尤其在孕妇中补体激活更显著。2、在细胞水平探究补体与HEV复制的相关性HEV感染孕妇会显著激活补体系统,为进一步研究HEV感染孕妇后病毒复制与补体激活的相关性,我们在细胞水平上进行了验证。结果发现:灭活补体的血清会增强HEV的复制,反之,向灭活补体血清中添加不同浓度的补体后,补体会显著抑制HEV的复制。3、利用动物模型探究补体与HEV复制的相关性HEV感染孕妇可以刺激补体的激活,并且利用孕妇血清可以促进HEV复制;当灭活血清中的补体,能够促进病毒在细胞中的复制。为进一步验证补体与HEV复制的相关性,我们在动物模型上进行了研究,结果发现:CD59和C5b-9蛋白在HEV感染的BALB/c小鼠及恒河猴肝组织中高表达,说明:HEV感染可激活动物体内的补体。并在HEV感染的BALB/c孕鼠体内检测到IL-10、IL-12和TNF-α的上调说明HEV感染可引发机体的炎症。本论文通过临床调查、细胞水平和动物模型实验,发现HEV感染可以刺激机体补体的激活,宿主免疫系统激活补体参与了抵抗病毒的感染。我们研究发现补体与HEV复制具有密切的相关性,抑制补体激活将有利于病毒的复制,为进一步研究HEV的致病机制和抗HEV药物的筛选提供理论基础。