【摘 要】
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L-2-氨基丁酸(L-2-ABA)是一种非天然手性氨基酸,是合成几种重要药物的关键手性中间体原料,酰胺化L-2-ABA制备得到的(S)-2-氨基丁酰胺是制备抗癫痫药物左乙拉西坦和布瓦西坦的关键前体,还原L-2-ABA制备得到的(S)-2-氨基丁醇是抗结核药物乙胺丁醇的关键原料。亮氨酸脱氢酶(LDH)被广泛用于制备L-2-ABA,但是中间产物2-酮丁酸(2-OBA)抑制LDH的催化活性导致通路难以继
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L-2-氨基丁酸(L-2-ABA)是一种非天然手性氨基酸,是合成几种重要药物的关键手性中间体原料,酰胺化L-2-ABA制备得到的(S)-2-氨基丁酰胺是制备抗癫痫药物左乙拉西坦和布瓦西坦的关键前体,还原L-2-ABA制备得到的(S)-2-氨基丁醇是抗结核药物乙胺丁醇的关键原料。亮氨酸脱氢酶(LDH)被广泛用于制备L-2-ABA,但是中间产物2-酮丁酸(2-OBA)抑制LDH的催化活性导致通路难以继续。因此,本研究定向改造LDH获得突变株,减轻2-OBA的抑制并增加酶的活性;同时通过RBS序列协调用于
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金属纳米簇具有成本低、易制备、生物相容性好等特性,已广泛应用于金属离子、蛋白质、核酸等多种物质的检测,而在农药检测方面的应用相对较少。近年来,有机磷农药和氨基甲酸酯类农药在农业生产中大量使用,对人体健康和环境造成威胁。在之前的报道中,基于有机磷农药和氨基甲酸酯类农药对特定酶(乙酰胆碱酯酶等)活性的抑制作用发展了许多传感器,但是酶成本较高且酶活性容易受环境影响。基于此本文主要在无酶的条件下利用金属纳
L-天冬酰胺酶(L-asparaginate amidohydrolase,EC 3.5.1.1)能够水解L-天冬酰胺生成L-天冬氨酸和氨,广泛存在于微生物、植物和部分啮齿类动物的血清中。在医药行业中,可用于治疗急性淋巴细胞白血病、霍奇金淋巴瘤和淋巴系统恶性肿瘤等多种疾病,在食品行业中,可用于高温油炸食品中,减少致癌物质丙烯酰胺的生成。本研究通过构建酶活及热稳定性显著提高的L-天冬酰胺酶突变体,并
角蛋白酶(keratinase)是一类能够特异性催化角蛋白底物的蛋白酶,在饲料添加、绿色制革、化妆品和医药等领域具有广泛的应用潜力。然而,应用环境的温度耐受能力一直是制约其催化效率的关键。因此,开发热稳定性良好的突变体已成为角蛋白酶研究的重点。本研究以重组角蛋白酶KerZ1为研究对象,基于定点突变技术,通过计算蛋白折叠自由能、氨基酸残基的B-factor值以及Loop区的柔性,获得若干热稳定性显著
外泌体是由各种类型细胞分泌的纳米级别(30-150 nm)的胞外囊泡,通过转运miRNA、mRNA、DNA和蛋白质等功能活性物质,在细胞与细胞之间的通讯中发挥着重要作用。牛奶来源外泌体不仅易于获取、价格适中还具有高生物相容性、长循环半衰期及低免疫原性等特性,已被广泛应用于纳米药物递送系统。为了更好地研究牛奶来源外泌体蛋白质及蛋白质翻译后修饰在靶向载药应用中的功能,我们需要对外泌体中蛋白质及糖基化修
真菌多糖大多从食、药用真菌中提取而来,已广泛应用于传统饮食和药物,其中灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP)是应用范围较广的代表之一,具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节和肠道菌群调节的作用。灵芝多糖的合成途径较复杂,以核苷酸糖为供体的多糖的合成机制尚不清晰,因此,本研究基于前期对灵芝的全基因组序列注释和转录组水平分析,选取与多糖合成相关的葡萄糖基转移酶GL2
在大肠杆菌中,补充甜菜碱能上调编码葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的zwf表达,导致NADPH增加,有利于L-苏氨酸合成。甜菜碱通过proP编码的一种H+-溶酶体合成器ProP或proVWX编码的一种ABC转运器ProVWX进出大肠杆菌。ProP和ProVWX通过运输包括甘氨酸甜菜碱在内的微弱离子渗透体来介导渗透压保护大肠杆菌。大肠杆菌也可以通过betABIT编码的各种酶合成甜菜碱。目前,ProP、ProV
D-阿洛酮糖是一种具有保健功能的稀有糖,在食品、医药等方面发挥着重要作用。本研究将昆虫伯克霍尔德菌(Burkholderia insecticola)来源的D-阿洛酮糖-3-差向异构酶(D-psicose-3-epimerase,DPE),福氏志贺菌(Shigella flexneri 2a str.301)来源的L-鼠李树胶糖激酶(L-rhamnulose kinase,Rha B)以及苜蓿中华
戊二酸是一种重要的五碳化合物,被广泛应用于塑料化工、医药和农业等领域。与传统的化学合成法相比,以5-氨基戊酸为底物的酶转化法是目前备受关注的戊二酸生物合成法之一。但是其底物价格昂贵,且产量、产率和生产强度并未达到大规模工业化生产的要求。本研究开发了以廉价易得的L-赖氨酸为起始底物,通过多酶级联转化生产戊二酸,并结合RBS调控、蛋白质工程以及转运工程等策略,显著提高了转化L-赖氨酸生产戊二酸的催化效
低分子量β-葡聚糖(Low-molecular-weight β-glucan,LBG)具有独特的生理生化活性,有保湿、防晒、抗氧化、抗菌、促溶解等多种功能,目前主要应用于食品添加、煤炭采集、医药缓释、化妆品构成、农业添加剂等领域,具有良好的应用场景,近年来,国内外对低分子量β-葡聚糖多功能性的研究日趋增多,但是制备研发低分子量β-葡聚糖的方法存在成本高、破坏环境、转化率低等方面的问题。粗甘油是一
先天性糖基化疾病(Congenital disorders of glycosylation,CDG)是一类罕见的遗传性疾病,由编码寡糖链生物合成过程中相关酶的基因缺陷导致。ALG1基因编码的β1,4甘露糖基转移酶Alg1参与内质网寡糖链初始阶段的生物合成,该基因缺陷导致多萜醇寡糖(Dolichol linked oligosaccharides,DLO)无法被顺利的合成,进而影响生命体正常的活动