【摘 要】
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当前,关于大蒜内生菌的研究报道少见。由于大蒜具有很强的杀菌抑菌作用,因此大蒜内生菌也可能具有与其宿主植物相同的生物学作用。因此,研究大蒜拮抗菌株对植物病原真菌的抑制作用,将其开发成天然、高效、环保的生物农药,具有重要的应用潜力。本研究以采集自全国不同地区的20种大蒜鳞茎为样品,从中共分离得到208株大蒜内生菌。根据菌落颜色、形状等特征去除相同菌株,对剩余的大蒜内生菌进行16S r DNA和ITS-
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当前,关于大蒜内生菌的研究报道少见。由于大蒜具有很强的杀菌抑菌作用,因此大蒜内生菌也可能具有与其宿主植物相同的生物学作用。因此,研究大蒜拮抗菌株对植物病原真菌的抑制作用,将其开发成天然、高效、环保的生物农药,具有重要的应用潜力。本研究以采集自全国不同地区的20种大蒜鳞茎为样品,从中共分离得到208株大蒜内生菌。根据菌落颜色、形状等特征去除相同菌株,对剩余的大蒜内生菌进行16S r DNA和ITS-1,3基因测序,根据测序结果去除相同菌株,共得到20株大蒜内生细菌、5株内生真菌、5株内生放线菌。其中内生细菌的优势菌属为芽孢杆菌属（Bacillus）、假单胞菌属（Pseudomonas）、泛菌属（Pantoea）、不动杆菌属（Acinetobacter）;内生真菌的优势菌属为链格孢属（Alternaria）;内生放线菌的优势菌属为链霉菌属（Streptomyces）。以9种植物病原真菌为目标菌株,采用平板对峙法检测大蒜内生菌对植物病原菌的拮抗活性,结果显示共22株菌能同时抑制5种以上植物病原真菌,它们均为内生细菌和内生放线菌,未发现有拮抗活性的内生真菌。其中又有8株菌能同时抑制9种植物病原真菌。对这22株拮抗菌株产生物被膜、纤维素酶及淀粉酶活性的能力进行检测,结果显示菌株KLBMPGC67、KLBMPGC81、KLBMPGC90、KLBMPGC99、KLBMPGC125这5株内生细菌表现出更好的活性。对这5株高拮抗大蒜内生细菌的抑菌机理进行深入研究,5株菌的发酵液表现出不同的拮抗活性,其中KLBMPGC90的拮抗活性最强,其发酵液能同时抑制7种植物病原真菌的生长;在一定时间内其发酵液抑制病原真菌孢子生长的效果略好于50%多菌灵;且该菌株在较低的浓度下对植物病原真菌仍具有明显的抑制效果。而KLBMPGC125的拮抗活性在5株菌株中最差。从能够抑制大蒜白腐小核菌的内生菌中筛选出了6株抑菌率较高的内生菌进行大蒜盆栽实验,以研究大蒜内生菌对大蒜白腐病的影响。结果显示6株大蒜内生菌均能明显降低大蒜感染大蒜白腐病的发病率,其中以菌株KLBMPGC136和KLBMPGC153的效果最明显,通过与对照组的比较,均能明显抑制大蒜白腐小核菌。本研究较为充分的展示了大蒜内生菌的多样性及其抗植物病原真菌活性,探讨了大蒜拮抗菌株对多种植物病原真菌的广谱抗性以及抑菌效果,并对它们的抑菌机理进行了进一步探讨。此外,本研究将大蒜内生菌接种于大蒜活体进行盆栽实验,以研究大蒜内生菌对其宿主植物大蒜感染大蒜白腐病的影响。本实验结果为将大蒜内生拮抗菌株开发成生物农药、有效防治多种植物病害奠定了理论基础。
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