论文部分内容阅读
目的：Mastlgi肾炎(mastlgi glomertJlonephritis MGN)是一种典型的抗肾小球基底膜性肾小球肾炎，其主要临床表现为肾病综合征，随着疾病的发展甚至会引起肾功能的严重损伤。目前多采用激素类、免疫抑制剂等药物进行治疗，但其毒副作用较明显，所以寻找具有多种治疗作用、无毒或低毒的安全药物对肾脏疾病的治疗有很大的意义。我们通过给家兔注射羊抗兔肾血清制备Mastgi肾炎动物模型，同时以中药复方肾舒康进行干预性治疗，并设雷公藤多甙组作为对照，旨在通过观察实验动物蛋白尿、肾功能、血浆蛋白、血脂、血流变以及肾脏病理形态学的变化，来观察。肾舒康对MGN的治疗作用及其可能的机理，为临床用药提供可靠的实验基础和理论依据。
方法：①制备兔肾抗原：取家兔肾皮质5g研成匀浆，与弗氏完全佐剂混匀成10ml，加生理盐水20ml，反复研磨制成油包水混悬液，即兔肾抗原。②制备羊抗兔肾血清：取上述抗原，给绵羊皮下分5处注射，每处1 ml，每2周1次，共4次。末次注射后2周，采羊血，分离血清，加入经生理盐水洗涤3次的等量兔红细胞，混匀，置4℃冰箱过夜使之充分吸附，离心后取上清液，于56℃水浴中灭活0.5h，此即羊抗兔肾血清(用双向琼脂扩散法测定，抗血清效价为1：32)。③复制模型：选用健康新西兰种大耳白兔(9周龄，体重2±O.25kg)，雌雄各20只，适应性喂养1周，两次测尿蛋白均为阴性。将家兔随机分为正常组、模型组、阳性药物对照组、。肾舒康治疗组，每组10只，除正常组外，其它各组家兔均经耳缘静脉注射羊抗兔肾血清，每次2ml，间隔0.5h注射1次，共6次，注射6次后检测尿蛋白为阳性，证明造模成功。于造模后的第1天开始给对照组及治疗组分别灌服雷公藤多甙和肾舒康，连续4周。在造模后和动物杀检前收集24 h尿液进行尿蛋白定量检测。于第29天杀检动物，取血，用全自动生化分析仪检测各组家兔血清总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、尿素氮(BUN)、肌酐(Scr)，检测家兔全血黏度(η b，高切、低切)、血浆黏度(η p)、纤维蛋白原(Fig)、红细胞压积比HCT)，取肾组织行光镜、电镜及免疫荧光检查。
结果：
(1) 24h尿蛋白定量动物注射羊抗兔肾血清后，除正常组外，其它各组动物均出现大量蛋白尿，与正常组相比均有非常显著差异(P<0.01)；药物干预治疗4周后，肾舒康组和雷公藤多甙组动物的24h尿蛋白定量均明显下降，与模型组相比均有显著性差异(P<0.01)；其中肾舒康组尿蛋白略高于雷公藤多甙组，但两组相比无显著性差异(P>0.05)。
(2)生化检测模型组血清Scr、BUN与正常组相比显著升高(P<0.01)；肾舒康组和雷公藤多甙组与模型组相比，血清Scr、BUN明显降低(P<0.01)；两治疗组相比较，肾舒康组血清Scr、BUN略高于雷公藤多甙组，但无显著性差异(P>0.05)。模型组血清TP、Alb较正常组明显降低(P<0.0 1)：两治疗组血清TP、Alb与模型组相比明显升高(P<0.01)：两治疗组相比，肾舒康组血清TP、Alb稍低于雷公藤多甙组，但无显著性差异(P>0.05)。模型组与正常组相比，血清TC、TG均明显升高(P<0.01)；两治疗组与模型组相比，血清TC、TG明显降低(P<0.01)；两治疗组相比，肾舒康组血清TC、TG稍高于雷公藤多甙组，但无显著性差异(P>0.05)。模型组ηb(200sM<'-1>、5s<'-1>)、ηp、Fig、HCT与正常组相比均显著升高(P<0.0 1)；两治疗组与模型组比较，η b(200s<'-1>、5s<'-1>)、Fip、Fig、HCT均明显降低(P<0.01)：其中‘肾舒康组各指标均略低于雷公藤多甙组，但两组相比无显著性差异(P>0.05)。
(3)肾组织病理形态学观察光镜下：模型组可见局灶阶段性肾小球硬化，多数肾小球系膜弥漫性增生，肾小球囊壁层细胞增生，偶见新月体形成；毛细血管内皮细胞变性，管腔扩张充血；肾小管上皮细胞颗粒样变性、肿胀，管腔狭窄，部分小管腔内可见蛋白管型；间质有炎细胞浸润，可见散在的纤维增生。电镜下可见基底膜节段性不规则增厚，肾小球上皮细胞足突广泛融合，毛细血管内皮细胞严重肿胀。免疫荧光可见IgG沿基底膜和系膜区点线状沉积，未见补体C<,3>沉积。与模型组相比，肾舒康组未出现。肾小球硬化，系膜增生不明显，肾小球囊内壁光滑，未见新月体形成：毛细血管内皮细胞轻度肿胀，肾小管、间质病变明显减轻，基底膜增厚及毛细血管内皮细胞肿胀不明显，肾小球上皮细胞足突仅有少量融合。免疫荧光可见少量IgG沿基底膜点线状沉积，未见补体C<,3>沉积。雷公藤多甙组肾脏的病理改变与肾舒康细.相似，但肾小管和间质纤维增生程度比肾舒康组轻。
结论：1、肾舒康可以减少MGN家兔尿蛋白、提高血浆蛋白，改善脂代谢，调节血流变，降低血清Scr、BUN，具有保护肾功能的作用。2、肾舒康能减轻肾小球肿胀、内皮细胞增生及白细胞浸润，改善肾小球的病理损伤情况。3、肾舒康对MGN家兔模型的干预作用与雷公藤多甙基本相同。