无指盘臭蛙蛙脑活性肽分子克隆以及结构与功能的研究

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大量研究表明,两栖类动物皮肤是生物活性物质丰富的资源库。而抗菌肽(Antimicrobial peptides, AMPs)作为机体先天防御系统的重要组成部分,在两栖类皮肤分泌液中含量异常丰富。无指盘臭蛙(Odorrana grahami)是我国特有种之一,其分泌液具有很强的抗菌,溶血以及蛋白酶抑制剂活性。本课题主要研究生物活性肽在无指盘臭蛙除皮肤外其它组织中存在的广泛性,筛选出更多可供药物研究的分子资源库,对无指盘臭蛙蛙脑中活性肽的分子多样性并对其结构和功能进行研究。以来源于单个无指盘臭蛙(Odorrana grahami)个体蛙脑中提取的InRNA为材料,建立了无指盘臭蛙蛙脑cDNA文库,得到大约为1×106个独立的克隆。从单个无指盘臭蛙蛙脑里面,克隆得到了21条抗菌肽序列,它们编码17条新的抗菌肽。这17条抗菌肽分别属于15个不同的抗菌肽家族;其中13个属于已知13个抗菌肽家族,它们分别是:odorranain-OGA1、Ranamargarin、odorranain-H2、odorranain-C7、odorranain-P1b、odorranain-Q1、odorranain-04、esculentin-1-OG2、esculentin-2-OG10、nigrosin-OG20、nigrosin-OG17、Ranatuerin-2R-OG、brevinin-2E-OG1。另外4个属于2个新的抗菌肽家族odorranain-X和odorranain-Y.4个新的抗菌肽分别命名为odorranain-X 1、odorranain-X2、odorranain-X3和odorranain-Y。这17条抗菌肽中有7个抗菌肽没有在皮肤的cDNA文库中发现,它们分别是Ranamargarin、odorranain-O4、Ranatuerin-2R-OG以及odorranain-X1、odorranain-X2、odorranain-X3和odorranain-Y.综上所述,本研究为寻找新型抗生素药物——抗菌肽(抗感染类)提供了更多的设计模板。
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