论文部分内容阅读
本文对北细辛（ Asarum heterotropoldes Fr. Schmidt var. mandshuricum（Maxim.） Kitag.）水溶性多糖的理化性质、结构特征以及免疫学活性进行了研究。首先,应用水提醇沉法获得细辛粗多糖,确定其物理化学性质;然后,通过Sevag法脱蛋白、醇沉分级、阴离子交换层析和凝胶层析对细辛粗多糖进行进一步地分离纯化,获得均一的多糖组分;在此基础上,应用高碘酸氧化及Smith降解、甲基化分析等化学方法和红外光谱分析、气质联机、13C-NMR等光谱学方法对均一多糖进行化学结构的分析;最后,结合药理实验探讨细辛多糖的生物学活性。细辛全草粉碎后经沸水提取得到细辛粗多糖,总得率为9.6%。理化性质分析表明细辛粗多糖主要由葡萄糖和半乳糖醛酸组成,此外还含有少量的木糖、半乳糖和阿拉伯糖;苯酚-硫酸法测定总糖含量为51.9%;间羟基联苯法测定糖醛酸含量为17.4%;考马斯亮兰法测定蛋白质含量为0.9%;碘-碘化钾法测定淀粉含量为24.17%;细辛粗多糖比旋光度为[α]D20=+168.8。细辛粗多糖经Sevag法脱蛋白、醇沉分级、DEAE-纤维素离子交换层析及凝胶层析分离纯化,得到17个多糖级分,分别为HA,HA1,HA1-1 ,HA1-2,HA1-3,HA1-4,HA1-3a,HA1-3b,HA1-3c,HA1-3d,HA1-3e,HA2,HA2-1,HA2-2,HAS,HAM和HAN。凝胶层析和高效液相层析（HPLC）进行分子量分析表明HAS是均一的多糖级分,分子量为11万。高效液相层析（HPLC）测定HAS由阿拉伯糖（50.1%）、半乳糖（28.7%）和半乳糖醛酸（21.2%）组成。糖组成分析、分子量分析、红外光谱、高碘酸氧化及Smith降解、甲基化和13C-NMR等方法综合运用分析HAS的结构,结果表明均一多糖HAS由α-（1→3）-D-Araf、β-（1→4）-D-Galp及α-（1→4）-D-GalpA组成。HAS的分支率较低,平均每15个糖残基有一个分支。应用MTT法对细辛多糖进行了体内免疫活性实验,结果表明其能够显著地促进小鼠脾脏T、B淋巴细胞的增殖。