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目的 探讨血管内皮生长因子、P53蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中的表达及两者之间的关系,以及两者与卵巢癌临床病理特征间的关系。 方法 1、标本来源:中国医科大学第一临床医院1990年1月-2001年1月手术切除的卵巢浆液性肿瘤标本65例,其中良性肿瘤10例,交界性肿瘤13例,卵巢浆液性囊腺癌42例。正常卵巢(子宫肌瘤同时行附件切除术者的卵巢组织,经HE染色确定)10例。按国际妇产科联盟(FIGO)1985年手术病理分期标准,42例卵巢浆液性囊腺癌中Ⅰ-Ⅱ期4例,Ⅲ-Ⅳ期38例。病理分级:G1级9例、G2级18例、G3级15例。2、方法:免疫组化采用链霉素抗生素蛋白-过氧化酶连接法(S-P法)。具体步骤:石蜡切片脱蜡和水化;加过氧化酶阻断内源性过氧化物酶的活性,室温下孵育10min;PBS冲洗后,对相应抗原进行微波加热及水煮修复,加血清室温下孵育20min;加一抗,室温下孵育90min;加二抗室温下孵育45min;PBS液缓冲、加辣根过氧化物酶复合物孵育30min后DAB显色,镜下观察1-3分钟,苏木素复染、水洗、脱水、透明,中性树胶封固成片。3、试剂:一抗:鼠抗人P53单克隆抗体,兔抗人VEGF多克隆抗体。二抗:生物素化二抗。SP免疫组化试剂盒4、结果判定标准:P53的阳性染色标准按照Kang标准:定位于肿瘤细胞核的棕色染色为准,<20%的细胞着色为阴性,20%以上的细胞着色为阳性;VEGF的阳性染色标准按照Triest标准:定位于肿瘤细胞浆的棕色染色为准,<10%的细胞着色为阴性,10%以上的细胞着色为阳性。同一人复核阳性细胞百分率,百分比与前次相差>5%者重数。5、统计学分析:采用S驼a0.0软件包护检验J<0.05有统计学意义。 结 果 VEGF、M3蛋白在卵巢浆液性囊腺癌中均呈高表达,阳性表达率分别为52.4%34.8%。在良性、交界性卵巢肿瘤组织中阳性表达率分别为20%J0%及46.2%/6.2%。两者在卵巢恶性组织中的阳性表达率显著高于其在卵巢正常组织及良性肿瘤组织中的阳性表达率(P<o.05入而与交界性肿瘤中的阳性表达率无显著性差异;VEGF、P53蛋白在低分化卵巢浆液性囊腺癌中阳性_表达率分别为73.3%及80%,在高分化及中分化卵巢浆液性囊腺癌中VEGF、P53蛋白阳性表达率分别为3/9在/9和55.6%、M.4呢,前者明显高于后者口<o.05八*E*民伤 蛋白的阳性表达率随临床分期的增加而增加,二一11期分别为1/4刀。皿一W期分别为55.3%在O.5防,存在显著性差异(P<o.05人在42例卵巢浆液性囊腺癌中,VEGF、P53蛋白同时表达者占 38.l%,p3蛋白。VEGF单一表达率分别为16.7%和14.3%。两者的协同表达率高于单一表达率,p3蛋白表达阳性的卵巢癌组织中VEGF的表达阳性率为69.6%,P53蛋白表达阴性的卵巢癌组织中VEGF的表达阳性率为31.6%,前者明显高于后者(P<O.%人 结 论 VEGF历3在卵巢癌的发生、发展中起重要作用;突变型p3基因能调控hGF在卵巢癌中的表达,两者有协同作用。