厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的分离与纯化工艺研究

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提取、分离植物中的有效成分是进行合理组方、药理药效、结构鉴定等研究的必要前提,也是中草药现代化的最关键步骤。厚朴为多种传统中药与新药的主药,用途广泛。厚朴中的主要成分为厚朴酚与和厚朴酚,其含量多少直接决定厚朴的品质。本研究以不同产区不同部位的厚朴为原料,以厚朴酚与和厚朴酚为研究对象,对厚朴酚与和厚朴酚的含量测定方法,不同产区与不同部位的厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量分析,以及厚朴酚与和厚朴酚分离纯化等方面进行了较系统的研究,取得了以下的结果:1.建立了厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的HPLC定量分析检测方法,其色谱条件为:色谱柱为C18(250 mm×4.6 mm,5 um),流动相为甲醇-水(80:20),流速0.8 mL/min,检测波长292 nm,柱温30℃,进样量20μL。该方法能准确、迅速的分别测定厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量。2.通过比较分析湖南张家界、隆回地区厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量,并以全国品质较好的湖北恩施地区的厚朴为对比,结果表明同一采收条件下的上述3个产区的厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量相似。就不同部位厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量,以根皮中和枝皮中的厚朴酚与和厚朴酚的含量最高。通过对不同药材市场的采样发现,目前药材市场出售的厚朴品质参差不齐。3.厚朴酚与和厚朴酚的提取,从提取效率来看,提取方法中,采用连续提取法提取率最高,总酚可达43.642 mg/g。在提取试剂里,采用甲醇为提取溶剂,其提取率最高,提取含量可达总酚42.449 mg/g。从提取纯度来看,以石油醚为提取溶剂,其提取纯度最高,纯度可达98.027%。4.通过单因素和正交试验,优化回流提取法和超声提取法工艺,确定最佳的生产工艺参数。超声提取实验中,厚朴酚最佳提取工艺为物料比1:20,甲醇浓度90%,提取时间50min,提取次数为2次;和厚朴酚物料比1:30,甲醇浓度90%,提取时间50min,提取次数为3次物料比30倍;总酚最佳提取工艺为甲醇浓度90%,提取时间40min,提取次数为2次。回流提取实验中,厚朴酚为物料比1:60,甲醇浓度80%,提取时间2.0 h,提取次数为3次;和厚朴酚的即物料比1:60,甲醇浓度90%,提取时间2.0 h,提取次数为4次;总酚的物料比50倍,甲醇浓度70%,提取时间2.0 h,提取次数为4次,经验证结果理想。5.在前人研究的基础上,通过试剂提取并结合硅胶柱层析,对厚朴中厚朴酚与和厚朴酚进行纯化,得到厚朴酚与和厚朴酚的晶体,其中纯度均为98%以上,并对晶体进行了分析与鉴定,确定为厚朴酚与和厚朴酚晶体。上述纯化工艺成熟,得率较高,并能得到高纯晶体,适合工业生产。
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