索拉非尼是一种多靶点的分子靶向性新药，用于治疗转移性肾癌和肝癌。它的分子靶点包括Raf-1，VEGFR和PDGFR等。有报道指出索拉非尼可以通过下调Mcl-1的表达量诱导急性髓系白血病细胞凋亡。还有研究发现在50％急性髓系白血病病人中STAT3处于持续活化状态，并且Mcl-1是受STAT3的调控。这些结果提示索拉非尼诱导急性髓系白血病细胞的凋亡作用可能与抑制STAT3活性有关。　　于是在第一章我们研究了索拉非尼对STAT3的作用。结果发现索拉非尼可以抑制急性髓系白血病病人外周血细胞中的STAT3酪氨酸位点的磷酸化水平。这一结果在急性髓系白血病细胞系HL60中也得到了证实。索拉非尼同样也对STAT3转录水平和下游基因Mcl-1和Bcl-2的表达有下调作用。通过进一步研究发现索拉非尼对STAT5也有抑制作用，但是对STAT1无影响。为证明索拉非尼对STAT3活性的抑制会导致髓系白血病细胞的凋亡，我们用siRNA和抑制剂AG490特异性阻断STAT3通路，结果发现两种髓系白血病细胞系的凋亡明显增加。另外用慢病毒载体过表达持续活化的STAT3可以增加HL60细胞对索拉非尼的耐受，凋亡现象明显减少。在这一章中我们还研究了索拉非尼与伊马替尼联合使用对于髓系白血病的治疗效果。结果发现联合使用在抑制K562细胞增殖上存在协同作用，因此联合使用这两种药物有可能用于慢性髓系白血病治疗。在第一章的最后一节，我们发现如果在骨髓细胞或脾脏细胞上过表达持续活化的STAT3会使CD45Rhigh的细胞显著增多，这一现象对理解多发性骨髓瘤的发病机制可能有所帮助。　　在第二章里我们发现了索拉非尼在急性髓系白血病细胞中的新靶点Src激酶。索拉非尼对STAT3活性的抑制不是通过Jak激酶和下调IL-6的分泌，而是通过抑制Src激酶的活性，IC50在0.6μM左右。此外在HL60细胞中，我们通过免疫共沉淀实验证明了Src与STAT3存在相互结合，用Src激酶的抑制剂Src kinase inhibitor I可以抑制STAT3的磷酸化。用Src kinase inhibitor(I)同样可以诱导K562和HL60细胞的凋亡。发现Src激酶是索拉非尼在急性髓系白血病细胞中的直接靶点对于理解索拉非尼治疗急性髓系白血病的分子机理具有重要意义。　　在第三章，我们发现了索拉非尼的又一新靶点Lck激酶和由此引起的免疫抑制活性。通过比对Src和Lck两个激酶ATP结合区域的序列我们发现其中存在着很高的保守性。在小鼠的CD4+T细胞上和T淋巴瘤细胞系Jurkat细胞上的实验证明了索拉非尼抑制T细胞活化过程中Lck的磷酸化。通过免疫荧光染色发现Lck募集ZAP70的过程也同样被抑制。由于Lck是T细胞活化过程中的重要激酶，所以我们接着研究了索拉非尼对于CD4+T细胞增殖，活化和分化的作用。结果发现索拉非尼剂量依赖性的抑制各种抗原引起的CD4+T细胞的增殖，但对CD4+T的凋亡无影响。同时索拉非尼剂量依赖性地抑制活化分子CD25和CD69的表达。进一步研究发现，索拉非尼抑制Th1类细胞因子的产生并阻断CD4+T细胞向Th1细胞分化，而不影响Th2类细胞因子的产生。在T细胞介导的过敏性皮炎的小鼠模型中，索拉非尼剂量依赖性地改善2，4，6三硝基氯苯导致的小鼠耳肿胀。　　由于索拉非尼同时具有抗白血病和免疫抑制活性，这对与需要造血干细胞异体移植的白血病病人来说是十分有利的。为了找到具有这样作用特点免疫抑制剂，在第四章我们考察了几种结构新颖并且具有免疫活性的螳螂内生菌的代谢产物。让我们感到惊喜的是其中的Dalesconols A(19S28R)既具有很强的免疫抑制活性同时具有抑制慢性髓系白血病细胞增殖的活性。　　综上所述，本论文首次报道了Src激酶是索拉非尼在急性髓系白血病细胞中的直接靶点，并且Src-STAT3通路在索拉非尼诱导急性髓系白血病细胞凋亡过程中起重要作用同时首次发现了Lck激酶是索拉非尼在T细胞中的靶点和由此引起的免疫抑制活性。