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目的本研究基于中医“气血—脑髓”、“肾精—脑髓”相关理论，以神经干细胞增殖分化Notch信号调控通路为切入点，建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型，通过益气活血法和补肾生髓法及其代表方药对模型大鼠进行干预，观察模型大鼠Notch信号调控通路基因差异及差异蛋白的表达变化，探讨益气活血法和补肾生髓法的作用机制，为临床治疗缺血性中风提供实验依据。方法健康Sprague-Dawley(SD)大鼠60只，雄性，月龄4个月，体重280-320g。随机分为假手术组、模型组、益气活血组和补肾生髓组，每组15只。改良线栓法建立MCAO/R大鼠模型，同时以益气活血法代表方-脑络欣通和补肾生髓法代表方补肾生髓方取中等剂量，分别按8.54g/kg、12.87g/kg，益气活血组和补肾生髓组在复制MCAO/R模型前30min灌胃给药1次，持续给药7天，假手术组和模型组按同样方法予以等量生理盐水灌胃。采用基因芯片技术测定MCAO/R各组大鼠额顶叶皮质Notch信号转导通路基因表达变化。免疫组化Envision二步法检测各组大鼠缺血侧额顶叶皮质区β-catenin、Krt1蛋白的平均光密度值的表达变化。Western-Blot检测Nr4a2的相对灰度值的表达变化。数据采用SPSS17.0进行统计分析。统计图表绘制采用EXCEL2007软件。结果基因芯片共检测Notch信号通路91个基因。与假手术组比较，模型组14种基因（Axin1、Ctnnb1、Fzd2、Gsk3b、Krt1、Lmo2、Lrp5、Map1b、Ncstn、Notch4、Ptcra、Smo、Supt6h、Tead1）表达有显著差异，其中Notch4基因表达显著下调(P<0.05)，其它13种基因表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较，益气活血组17种基因（Cflar、Chuk、Ctnnb1、Fosl1、Fzd4、Hes1、hr、Krt1、Map2k7、Notch3、Notch4、Nr4a2、Pdpk1、Psen1、Rbpjl、Rfng、Zic2）表达有显著差异，其中Ctnnb1、Krt1、Nr4a2基因表达显著下调(P<0.05)，其它14种基因表达显著上调(P<0.05)。与模型组比较，补肾生髓组20种基因（Aes、Cflar、Chuk、Ctnnb1、Fos、Fzd1、Fzd2、Fzd4、Hey1、hr、Map2k7、Mycl1、Notch4、Nr4a2、Numb、Pdpk1、Rfng、Sel1l、Stat6、Tead1）表达有显著差异，其中Ctnnb1、Fzd1、Fzd2、Hey1、Mycl1、Nr4a2、Sel1l、Tead1基因表达显著下调(P<0.05)，其它12种基因表达显著上调(P<0.05)。与补肾生髓组比较，益气活血组7种基因（Cflar、Ctnnb1、Fzd2、Fzd5、Hes1、Mycl1、Zic2）表达有显著差异，其中Fzd2、Fzd5、Hes1、Mycl1、Zic2基因表达显著上调(P<0.05)，Cflar、Ctnnb1基因表达显著下调(P<0.05)。阴性对照组β-catenin、Krt1蛋白均未见表达，假手术组β-catenin、Krt1蛋白可见表达,主要表达于神经细胞胞浆。与假手术组比较，模型组β-catenin和Krt1蛋白表达显著升高(P<0.05)；与模型组比较，益气活血组β-catenin和Krt1蛋白表达显著降低(P<0.05)，补肾生髓组β-catenin蛋白表达显著降低(P<0.05)；益气活血组β-catenin蛋白表达显著低于补肾生髓组(P<0.05)。与假手术组比较，模型组Nr4a2蛋白表达显著增加(P<0.01)；与模型组比较，益气活血组和补肾生髓组Nr4a2蛋白表达显著减少(P<0.01)；与补肾生髓组比较，益气活血组Nr4a2蛋白表达显著减少（P<0.01)。结论在前期研究证实益气活血法能够促进局灶性脑缺血后神经干细胞的增殖分化，补肾生髓法具有促进脑缺血后突触重塑和神经细胞轴突再生作用的基础上，本实验发现益气活血法及其代表方脑络欣通和补肾生髓法及其代表方补肾生髓方能影响脑缺血再灌注后Notch信号调控通路部分基因表达，能通过降低皮质β-catenin、Krt1和Nr4a2蛋白的表达，对Notch信号通路产生调控作用，进而对脑缺血后内源性NSCs增殖分化产生影响。