重组人白细胞介素-6融合蛋白包含体的提取、洗 涤又超声变性

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该文和超声、高压匀浆和化学渗透法破碎重组大肠杆菌,以释放重组人白细胞介素-6融合蛋白包含体.研究了超声功率、菌体体积、菌体浓度对超声破碎的影响.选择破碎条件为菌体体积100mL,菌体浓度150g/L,在缓冲液50mmol/L Tris-HCl,pH8.0,50mmol/L EDTA,0.2mol/L NaCl中,用480J s<-1>的功率超声15min,包含体的回收率为41.5%.并确定超声破碎临界功率为34.25J s<-1>.研究了匀浆压力、匀浆次数对高压匀浆破碎的影响.用超声法结合尿素对包含体进行变性,研究了超声功率和时间,缓冲液体系和包含体浓度对变性的影响.选择适宜的变性条件为0.1mol/L Gly-NaOH,pH9.0,4mol/L尿素,50mmol/L β-ME,70J s<-1>超声15min.此条件下的变性效果与用8mol/L尿素变性的效果相当.
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