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目的 乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染是一个世界性的公共卫生问题，我国是HBV感染的高发区，而形成我国众多乙肝病毒携带者的重要原因是HBV宫内传播，但至今HBV宫内传播机制仍不完全清楚。目前认为HBV宫内感染有两条途径：血源性和细胞源性，此两条途径尚不能解释无此二因素而发生HBV宫内感染甚至仅表现为新生儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMC)HBV DNA阳性的现象，那么，HBsAg阳性孕妇PBMC是否可通过胎盘屏障致胎儿HBV感染，PBMC是否为HBV肝外复制场所?这是很值得探讨的与HBV宫内传播机制有关的重要问题。要搞清此问题，PBMC中是否存在HBV复制是关键。 有关PBMC HBV的复制问题，国内外研究甚少，唐时幸、刘志华等人的研究仅限于PBMC HBV DNA存在与否的检测及其与血清HBV DNA关系的分析，国外几项研究涉及成人PBMC HBV复制问题，但结论不一，Stoll-Becker等人研究表明HBV可在PBMC中复制产生有感染性的子代病毒，造成机体免疫功能紊乱，并与HBV在体内持续存在有关；而Kock等人的研究认为PBMC中所检出的HBV DNA是血浆中的病毒吸附于PBMC表面，并非是在PBMC中复制的HBV。HBV cccDNA(covalently closed circular DNA，共价闭合环状DNA)是HBV原始复制模板，在PBMC中检测到cccDNA成为确定PBMC是否为HBV肝外复制场所的关键，有关在PBMC中检测cccDNA的研究，国内尚无人报道，仅有董捷等人的研究涉及用sPCR的方法检测2．2．15细胞内的HBV cccDNA，研究者尽管建立了PBMCHBV复制状况的检测方法，但所检病例很少或为体外研究，很难以群体的观点了解人体内PBMC复制状况，得出客观结论。有关HBsAg阳性孕妇山窗医科大学硕士学位论文及新生儿PBMC HBV复制状况的研究，尚未见国内外报道。仅有涉及新生儿p日MC HBV感染问题的研究。综合目前国内外研究现状，本文进行了如下方面的研究:(l)llBsAg阳性孕妇及其新生儿出生时外周血l一IBV感染状况;(2)卜{BsAg阳性孕妇及其新生儿PBMC中HBV感染状况、IIBV复制状况及其与!IBV宫内感染关系的研究:(3) HBV宫内感染和PBMC中lll3V复制的危险因素研究。方法以2001年6月至2002年12月由太原市传染病院妇产科进行产前检查并分娩的HBSAg阳性孕妇为队列，从产前检查追踪观察至分娩，收集产前、产中及产后的临床流行病学资料，采集151例孕妇肘静脉血，153例新生儿出生24小时内股静脉血，进行PBMCr!BV复制状况及与HIW宫内感染关系的研究。 1.用EL工SA法检测孕妇外周血HBSAg、HBeAg及新生儿外周血朋SAg; 2.用巢式PCR(nPCR)法检测孕妇及其新生儿外周血1一!BV ONA; 3.用选择性PCR(sPCR)法检测孕妇及其新生儿PBMC中的l注13VI〕NA; 4.用巢式病例对照研究的方法进行新生儿宫内感染危险因素的分析和PBMC中HBv复制危险因素研究，并对其危险因素进行交互作用的分析。 5.资料输入Visual Fox pro6.0数据库，采用SPss10.o软件，计算各指标的阳性率，四格表xZ、fisher精确概率、OR值及0R95%可信区间，多因素分析用非条件Logistic回归模型分析。结果1.EL工SA法检测HBsAg，新生儿HBV宫内感染率为3.31%(5八51)，巢式PCI又检测外周血HBV DNA，新生儿HBV宫内感染率为1 9.21% (29/151)，选择性PCR检测PBMC中的HBV DNA，新生儿llBV宫内感染率为23.84%(36/151)，以其中任一项阳性为指标，共57例，新生儿l侣V宫内感染率为37.75%(57/251)。 2.用选择性pCR技术进行 HBsAg阳性孕妇及其新生儿pBMC中川WCCcDNA及卜IBV reDNA的检测。HBsAg阳性孕妇PBMC中有9.93%(15/一51)卜IBV cCcDNA阳性，新生儿PBMC中有4.58%(7/153)llBV ecCDNA阳性，7例新生儿PBMCI雀BV eeeDNA阳性者中71.43%(5/7)的母亲PBMC 11BV。CcDNAl旧性，余2例新生儿的母亲PBMC HBV cceDNA阴性。 卜IBsAg阳性孕妇PBMC中有36.42%(55/151)llBV rcDNA阳性，新生儿PBMC中有22.88%(35/153)HBV reDNA阳性。山西医科大学硕士学位论文 lIBV eeeDNA或HBV reDNA任一项阳性者，HBsAg阳性孕妇57例，占总检测数的37.75%(57/151)，新生儿36例，占39.39%(36/153)。 3.用巢式病例对照研究的方法进行HBV宫内感染的多因素分析，孕妇尸BMC HBV reDNA(OR=2.47，1.22一4.98)、孕妇外周lfll- HBV DNA(OR=1.63，0.82一3.26)被引入回归方程。 4.用巢式病例对照研究的方法进行孕妇PBMCH盯复制的多因素分析，孕妇外周血HBeAg阳性(OR=3 .67，1 .19一n .35)被引入回归方程;新生儿PBMC卜IBV复制的多因素分析，结果孕妇PBMC HBV eeCI)NA阳性和新生儿PBMC HBV reDNA阳性被引入回归方程，OR值(OR95%可信区间)分别为38.02，(4.76一303.43)和29.95(2.41一303.74)，且此两因素间存在交互作用，归因交互效应百分比API为90.66%，效应指数S为11.15，交互作用超额相对危险度RERI为4.18，说明此两因素间的交互作用较强。结论1.以新生儿HBsAg、外周血IIBV DNA、PBMC 11BV DNA中任一项阳性来判定HBV宫内感染，宫内感染率为37.75%。 2.HBsAg阳性孕妇中