禹州漏芦诱导人多发性骨髓瘤U266细胞凋亡及其机制研究

来源 :山西医科大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:ch3192530
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目的:研究中药禹州漏芦(RadixEchinopsis)对人多发性骨髓瘤细胞株U266的诱导凋亡作用并初步探究其诱导凋亡的机制。为多发性骨髓瘤的治疗寻找一种有效低毒的中草药抗肿瘤制剂,有助于新药的开发和应用。方法:采用血清药理学的方法模拟禹州漏芦在体内发生的药物效应;首先将购得的禹州漏芦原药材利用醇提法制备不同浓度禹州漏芦粗提液(4g/ml,2g/ml,1g/ml),后分别灌胃大鼠,一定时间后腹主动脉采血,无菌分离血清,并将不同浓度禹州漏芦含药血清作用于人多发性骨髓瘤U266细胞株;Hoechst33258染色后激光扫描共聚焦显微镜观察不同浓度禹州漏芦含药血清作用后U266细胞凋亡形态;AnnexinV/PI双染后采用流式细胞技术检测不同浓度禹州漏芦含药血清作用后的细胞凋亡率;HDAC活性/抑制直接分析试剂盒(比色法)检测不同浓度禹州漏芦含药血清作用后骨髓瘤细胞内组蛋白去乙酰化酶(histonedecetylase,HDAC)的活性及其抑制率。结果:1将不同浓度禹州漏芦含药血清作用人多发性骨髓瘤U266细胞48h后在激光扫描共聚焦显微镜下可观察到处于不同凋亡进程中的细胞,且中浓度组和高浓度组可见凋亡小体。2流式细胞仪检测禹州漏芦含药血清诱导的细胞凋亡作用具有浓度、时间依赖性,且高浓度禹州漏芦含药血清可显著诱导多发性骨髓瘤细胞凋亡(P<0.001)。3HDAC活性/抑制试验结果显示,不同浓度禹州漏芦含药血清作用于人骨髓瘤U266细胞后,可检测到HDAC活性与剂量-时间呈负相关,抑制率随着时间及浓度的增高而增高(P<0.05)。结论:禹州漏芦具有抗骨髓瘤作用,禹州漏芦含药血清作用人多发性骨髓瘤细胞株U266后可诱导凋亡,其诱导凋亡的途径是通过降低HDAC活性。
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