基于分子印迹技术的莠去津竞争性金标试纸条研制

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本研究同时使用本体聚合与沉淀聚合法制备三嗪类农药莠去津的分子印迹聚合物,使用不同的功能单体、交联剂、致孔溶剂组合以制备莠去津的纳米级分子印迹微球,确定了最适制备纳米微球的方法,并测定其吸附性能。结果表明,选用MAA作为功能单体,TRIM作为交联剂、AIBN作为引发剂,乙腈/甲苯=3:1作为致孔溶剂所制备的聚合物颗粒要小于用其它反应原料,且使用该方法制得的聚合物对目标分析物的特异性吸附性能也要强于其它方法制备的聚合物。当投料配方为模板分子/MAA/TRIM=1:2:4,并用乙腈/甲苯=3:1作为致孔溶剂(PP-10),添加浓度为10μg/mL时,所得聚合物的印迹因子最大,为1.83。相比较本体法所得块状聚合物,其结合容量得到了显著提高。本研究所制得所有的纳米级分子印迹微球的结合容量均在80%以上,大大提高了吸附效率。根据文献报道制得莠去津的不完全竞争原后,在使用生物大分子作为载体的合成人工生物竞争原的同时,选用富含末端胺基的树状大分子PAMAM和富含末端羟基的葡聚糖作为载体合成了人工化学竞争原。本研究通过柠檬酸三钠法制备多种粒径的胶体金颗粒,在保护剂CMC的作用下,标记上述所得到的莠去津纳米级分子印迹聚合物(PP-10)。分别将上述人工生物竞争原和人工化学竞争原包被在NC膜上作为试纸条检测的C、T线。经过条件优化后,使用人工化学竞争原IC-competitor-PAMAM G3.010倍稀释液,金标MIP包被浓度为1000μg/mL时,其检出限为2μg/mL,可以满足半定量检测农药莠去津分子的要求,具有一定的运用价值。交叉反应实验证明本研究所制金标MIP试纸条特异性较好。本研究采用化学竞争原和抗体代替传统生物竞争原和抗体,在整个反应过程中尽量不使用生物大分子,而试图使用化学手段代替。使用这种方法,可以避免使用生物大分子过程中遇到的实际使用中不易保存、不可重复利用等缺点。本研究为农药残留快速检测提供了一种潜在的工具,对于完善我国食品安全检测体系,保障人们健康安全,具有十分积极的意义。
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