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目的探索前列腺特异性抗原(PSA)表达水平的变化对去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞增殖能力、侵袭能力和凋亡的影响,以期发现PSA在去势抵抗性前列腺癌进展中所发挥的潜在作用,为PSA作为去势抵抗性前列腺癌的治疗靶点提供更多依据。方法构建含有针对PSA基因的特异性短发夹RNA(sh RNA,分别为sh PSA1、sh PSA2、sh PSA3、sh PSA4)和阴性对照序列(NC)的质粒表达载体并由慢病毒颗粒包装后,分别感染去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞并筛选稳定表达PSA特异性sh RNA的sh PSA1-、sh PSA2-、sh PSA3-、sh PSA4-和表达NC序列的NC-22RV1细胞。使用荧光倒置显微镜观察被感染细胞内绿色荧光蛋白的表达情况,确保高效的感染效果。分别应用实时荧光定量聚合酶链反应(q RT-PCR)和Western blot检测sh RNA对22RV1细胞中PSA m RNA及蛋白表达的影响;挑选出PSA基因和蛋白表达降低的细胞株,用于后续实验;通过CCK-8试验检测22RV1细胞增值能力的变化;利用Transwell侵袭试验检测PSA基因沉默后细胞侵袭能力的变化;流式细胞术检测PSA基因沉默后的22RV1细胞凋亡率的变化。应用不同浓度的重组PSA蛋白对22RV1细胞进行处理后,应用CCK-8法检测外源性PSA对细胞增殖能力的影响。结果同NC-22RV1细胞相比,sh PSA1-、sh PSA2-和sh PSA3-22RV1细胞的PSA基因和蛋白表达水平出现不同程度的降低,其中sh PSA3-22RV1细胞的表达水平最低,q RT-PCR检测结果显示sh PSA1-、sh PSA2-和sh PSA3-22RV1细胞内PSA基因的表达水平分别为NC-22RV1细胞表达水平的38.2%、22.3%和9.5%,Western blot检测也验证了sh PSA3-22RV1细胞内PSA蛋白水平最低。在CCK-8细胞增殖试验中,sh PSA1组在0时、24时、48时、72时的OD值分别为0.0898±0.0011、0.2101±0.0043、0.3057±0.0269、0.4550±0.0128,sh PSA2组在24、48、72h的OD值分别为0.1564±0.0225、0.2438±0.0358、0.3641±0.0205,sh PSA3组分别为0.1069±0.0120、0.1588±0.0192、0.2534±0.0289,sh PSA1组同NC组的差异不显著,而sh PSA2和sh PSA3组同NC组的差异均有统计学意义(P值<0.01);加入不同浓度的重组PSA后,22RV1细胞的增殖能力得到显著提升,其中1000ng/ml PSA组最为明显(P<0.001);在侵袭试验中,sh PSA 1、sh PSA2、sh PSA3组侵袭力分别为NC组的77.35%(P=0.002)、54.35%(P<0.001)、42.21%(P<0.001),PSA沉默效率最高的sh PSA3组侵袭能力下降最大;在用流式细胞术检测细胞凋亡的试验中,sh PSA3组凋亡率为(20.20±0.72)%(P=0.160),sh PSA2组为(27.97±4.28)%(P=0.001)、sh PSA3组为(43.03±3.19)%(P<0.001),高于NC组(16.77±0.59)%的凋亡率,其中sh PSA3组凋亡率最高。结论PSA具有促进去势抵抗性前列腺癌22RV1细胞的增殖和侵袭效应,抑制PSA表达后前列腺癌22RV1细胞凋亡增加。此外,沉默效果不同的22RV1细胞株表现出不同的增殖能力、侵袭能力和凋亡能力,说明PSA对去势抵抗性前列腺癌细胞施加的作用是具有剂量依赖性。