CD4~+IL-17~+辅助性T淋巴细胞在肺腺癌胸膜转移的恶性胸腔积液中上调及其浸润机制

来源 :广西医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:loveme2001
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目的检测肺腺癌胸膜转移引起的恶性胸腔积液(Malignant Pleural Effusion, MPE)患者的胸腔积液及外周血(Peripheral Blood, PB)中的CD4+IL-17+辅助性T淋巴细胞(T helper 17,Th17)的比例。检测Th17细胞上相关趋化因子受体(CCRs)的表达情况,以及在体外检测MPE中趋化因子(CCLs)对Th17细胞的趋化活性,探讨Th17细胞浸润到胸膜腔的可能机制。方法同步收集14例肺腺癌胸膜转移患者的胸腔积液及其外周血,另外收集5例健康对照者(Healthy Donor, HD)的外周血。分离纯化其中的胸腔积液单个核细胞(Pleural Effusion Mononuclear Cells, PEMCs)和外周血单个核细胞(Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs),进行促进细胞因子分泌的刺激孵育后,以四色流式细胞检测技术检测上述标本中的Th17细胞的比例,及其细胞膜表面相关趋化因子受体的表达情况;随机抽取其中5例恶性胸腔积液患者,以细胞免疫磁珠分选法逐步分选出恶性胸腔积液患者外周血的CD4+IL-17+T淋巴细胞,以Transwell系统在体外检测恶性胸腔积液对同源外周血中Th17细胞的趋化效应,探讨CCRs和相关配体CCLs的趋化轴,在介导Th17趋化浸润到胸膜腔过程中的作用。结果(1)肺腺癌胸膜转移的恶性胸腔积液(MPE)中Th17占CD4+T细胞的比例(3.6793±0.50878%)显著高于在同源患者外周血(PB)中的比例(0.5886±0.08524%)(P=0.000),亦显著高于健康对照者外周血(HD)中的比例(0.8320±0.21613%)(P=0.000)。而在恶性胸腔积液患者的外周血中Th17占CD4+T细胞的比例与健康对照者外周血中的比例无统计学差异(P=0.212); (2)在MPE、PB及HD三组标本中,Th17均表达高比例的CCR4(MPE 65.8615±2.35143%、PB 62.0886±2.49920%、HD 75.8560±6.13051%)、CCR6(MPE 48.2521±4.75612%、PB 38.6336±4.22941%、HD 54.6280±8.74540%),和表达一定比例的CCR2(MPE 20.5564±2.67499%、PB 21.9757±2.16233%、HD 24.9160±4.56771%)、CCR5(MPE 26.8407±2.24145%、PB 24.7750±2.38923%、HD 22.5860±4.21803%),对三组样本中的Th17所表达的各项CCRs比例分别作两两比较,均无统计学差异(均为P>0.05); (3)MPE在体外对Th17细胞具有直接趋化活性(趋化系数CI为4.8908±0.54299);而MPE中分别加入抗CCL20单克隆中和抗体(CI:2.8811±0.13798,P=0.007)或抗CCL22单克隆中和抗体(CI:2.4038±1.39204,P=0.002),均可抑制此种趋化效应。结论证实肺腺癌胸膜转移的恶性胸腔积液(MPE)中Th17细胞的比例上调,显著高于同源外周血(PB)及健康对照者的外周血(HD),并且Th17细胞相对恒定地表达CCR2、CCR4、CCR5、CCR6分子,且Th17从外周血浸润到胸膜腔的过程未发生CCRs的表型改变。MPE能直接趋化外周血中的Th17细胞浸润至胸膜腔,此趋化效应很可能通过CCR4—CCL22趋化轴和CCR6—CCL20趋化轴所介导。
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