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目的研究N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(N-acetyl-seryl-aspartyllysyl-proline,Ac-SDKP)通过调节血管紧张素转换酶(angiotensin converting enzyme,ACE)2-血管紧张素(angiotensin,Ang)(1-7)-Mas轴,抑制大鼠矽肺纤维化的作用及其机制。方法采用非暴露式支气管灌注Si O2制作大鼠矽肺纤维化动物模型,实验分组为:正常4周组(control 4 w,C4)、矽肺4周组(silicosis 4 w,S4)、正常8周组(control 8 w,C8)、矽肺8周组(silicosis 8 w,S8)、Ac-SDKP前处理组(AcSDKP pre-treatment,Ac-pre)及Ac-SDKP后处理组(Ac-SDKP post-treatment,Acpost)。体外原代培养大鼠肺成纤维细胞,采用Ang II诱导肺成纤维细胞向肌成纤维细胞转化,实验分组为:对照组(control,C)、Ang II诱导组(Ang II)、给予Ac-SDKP(Ang II+Ac-SDKP)、Ang(1-7)(Ang II+Ang(1-7))及其Mas受体抑制剂A779干预组(Ang II+Ac-SDKP+A779,Ang II+Ang(1-7)+A779)。HE染色、VG染色观察肺组织病理形态;免疫组织化学染色法检测ACE2、α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)的定位表达;酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测大鼠血浆中Ang(1-7)的表达变化情况;采用免疫细胞荧光化学染色法检测Ang(1-7)及α-SMA的共定位表达;采用western blot法检测肺组织及肺成纤维细胞ACE2、Ang(1-7)、Mas、α-SMA及I型胶原蛋白的表达情况。结果1 HE染色结果显示,C4、C8组肺泡结构清晰,壁薄;S4组可见孤立的细胞性矽结节形成,伴有炎细胞浸润,S8组可见矽结节融合,VG染色胶原大量沉积。Ac-pre及Ac-post组矽结节数量和面积较S8组明显减少,伴有胶原沉积程度减弱。2免疫组织化学染色结果显示,α-SMA阳性表达于矽结节及间质纤维化区域;ACE2阳性表达于正常肺泡上皮细胞,而在矽肺结节及间质纤维化区域表达减弱或缺失。Western blot结果显示,与C4、C8组相比较,S4、S8组α-SMA、I型胶原蛋白表达水平明显上调,而ACE2、Ang(1-7)和Mas蛋白表达下调;与S8组相比较,Ac-post及Ac-pre组α-SMA和I型胶原表达下调,而ACE2、Ang(1-7)和Mas蛋白表达上调。3 ELISA检测的大鼠血浆中Ang(1-7)的表达水平S4组降低为C4组的62.92%,S8组降低为C8组的57.30%,Ac-pre和Ac-post组分别上调为S8组的1.60倍、1.68倍(P<0.05)。4免疫荧光结果显示,与对照组相比,AngII诱导组中α-SMA表达增强,Ang(1-7)表达减弱。与Ang II诱导组比较,给予Ac-SDKP、Ang(1-7)干预α-SMA表达减弱,Ang(1-7)表达增强;与Ac-SDKP、Ang(1-7)干预组相比,给予Mas受体抑制剂A779干预组中α-SMA表达增强,Ang(1-7)表达减弱。5 Westernblot结果显示,与对照组相比较,Ang II诱导组α-SMA及I型胶原蛋白表达升高,ACE2、Ang(1-7)、Mas蛋白表达下降;给予AcSDKP、Ang(1-7)预处理,ACE2、Ang(1-7)、Mas蛋白表达升高,而α-SMA及I型胶原蛋白表达下降;给予A779处理组可抑制Ac-SDKP、Ang(1-7)相关效应。结论1 ACE2-Ang(1–7)-Mas轴参与了矽肺纤维化的发生、发展。2 Ac-SDKP通过调节ACE2-Ang(1–7)-Mas轴发挥抑制大鼠矽肺纤维化作用。3 Ac-SDKP通过Mas受体蛋白发挥抑制成纤维细胞向肌成纤维细胞转化的作用。