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目的： 抑郁症是最常见的精神障碍之一，但其病因及发病机理尚不明确。其中，表观遗传学调控可能发挥重要作用，尤其是长链非编码RNA（lncRNA），作为表观遗传学调控的重要机制之一，因其数量最多、且可在不同水平进行基因调控，可能参与了抑郁症的发生及发展。课题组前期研究显示，抑郁症存在异常的lncRNAs表达及调控，且与神经可塑性密切相关的CREB存在共表达关系。因此，我们认为抑郁症中存在调控CREB的lncRNAs表达及功能异常。本研究拟在人群及细胞水平筛选及验证抑郁症CREB相关的lncRNAs。 方法： 1、初步筛选抑郁症CREB相关lncRNAs：利用前期芯片筛选结果进行生物信息学分析，确定与CREB存在共表达关系的lncRNAs；利用UCSC基因组数据库，寻找CREB基因调控区的lncRNAs。筛选出抑郁症CREB相关的lncRNAs。 2、人群水平验证确定抑郁症CREB相关关键lncRNAs：收集抑郁症与正常对照各35例，抑郁症给予SSRIs类抗抑郁药物追踪8周，收集研究对象外周血，检测前述筛选出的 lncRNAs，确定抑郁症CREB相关的关键lncRNAs。 3、细胞水平验证抑郁症CREB相关特异lncRNAs：将抑郁症CREB相关的关键lncRNAs制备干扰慢病毒，转染至神经干细胞，检测细胞内关键lncRNAs及CREB表达，检测神经细胞增殖情况，明确lncRNAs对CREB的调控作用。确定抑郁症CREB相关的特异lncRNAs。 结果： 1、初步筛选：通过芯片生物信息学分析，发现2个lncRNA chr20:46277638-46277729和chr4:73971145-73971245与mRNA CREB存在共表达关系；通过UCSC基因组数据库查找，找到4个lncRNA在CREB调控区，分别是UCA1，DQ786243，AK091534和AK123952。 2、人群验证： （1）芯片筛选lncRNA结果验证：检测抑郁症病例治疗前和治疗8周后、正常对照外周血CREB、chr20:46277638-46277729，chr4:73971145-73971245表达水平，结果发现CREB在病例对照组间有明显差异，病例组低于对照组（t=-2.372，P=0.021），经8周抗抑郁药物治疗后的表达明显高于治疗前（t=-2.103，P=0.043）；chr20:46277638-46277729表达在病例、对照组间无明显差异（t=0.202，P=0.841），在8周抗抑郁药物治疗前后亦无统计学差异（t=0.610，P=0.547）。chr4:73971145-7397245表达在病例组明显高于对照组（t=2.572，P=0.013），而经过药物治疗后表达明显高于治疗前（t=-2.484，P=0.020）。 （2）基因组数据库筛选结果验证：选择UCA1，DQ786243，AK091534进行验证，检测病例、对照及治疗后外周血 lncRNAs表达。结果发现 AK091534表达在病例组和对照组间无明显差异（t=-0.3171，P=0.865），经8周抗抑郁药物治疗后的表达与治疗前亦无统计学差异（t=0.113，P=0.911），治疗后与正常对照间亦无统计学差异（t=0.07，P=0.994）；UCA1表达在病例组明显高于对照组（t=4.439，P＜0.001），经8周抗抑郁药物治疗后UCA1表达无明显变化（t=1.648， P=0.104），治疗后比正常对照高（t=2.676，P=0.009）；DQ786243表达在病例组明显高于对照组（t=3.126，P=0.003），经8周抗抑郁药物治疗后 DQ786243表达变化不明显（t=1.264，P=0.215），治疗后表达明显高于正常对照（t=2.827，P=0.006）。相关分析显示，在病例组，CREB表达水平与 UCA1表达水平呈正相关（r=0.4489，P=0.0078），在治疗后两者表达仍呈正相关（r=0.7150，P＜0.0001）；在病例组，CREB表达水平与DQ786243表达水平呈负相关（r=-0.4743，P=0.004），在治疗后两者表达仍呈负相关（r=-0.7435，P＜0.0001）。 3、细胞验证：对前期人群水平验证的抑郁症CREB相关的2个关键lncRNA—UCA1和DQ786243制备干扰慢病毒，转染神经干细胞，对UCA1、DQ786243表达进行qRT-PCR检测，结果发现UCA1、DQ786243表达较空载体组明显降低，P值分别为0.0282和0.0228；CCK8细胞增殖实验显示，转染后24小时、48小时、72小时的UCA1、DQ786243均有抑制神经干细胞增殖的效应。检测慢病毒干扰后CREB mRNA及蛋白质表达，结果发现Plvx-UCA1和Plvx- DQ78624细胞中CREB mRNA表达明显低于空载体组，P值分别为0.0416和0.0362；CREB蛋白质在Plvx-UCA1和Plvx-DQ78624细胞与空载体细胞无统计学差异，磷酸化CREB蛋白pho-CREB在Plvx-UCA1和Plvx-DQ78624细胞表达明显降低，P值分别为0.0362和0.0092。 结论： 1、MDD存在外周血CREB以及调控CREB的 lncRNAs表达异常，UCA1和DQ786243与MDD发病相关。 2、UCA1和DQ786243与MDD发病时的严重程度有相关关系，UCA1与MDD严重程度成正相关，DQ786243与MDD严重程度成负相关。 3、UCA1和DQ786243可抑制神经干细胞的增殖，降低神经干细胞细胞CREB mRNA的表达，并进而降低pho-CREB蛋白质表达。