论文部分内容阅读
目的通过观察比较小檗碱、梓醇及其配伍对胰岛素抵抗(Insulin Resistance,IR)3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗及肿瘤坏死因子α(TNF-α),白细胞介素1β(IL-1β)与白细胞介素6(IL-6)分泌及mRNA表达的影响,进而从炎性因子途径探讨小檗碱、梓醇与其配伍改善IR的作用机制和黄连丸方剂配伍的科学内涵。方法第一部分小檗碱与梓醇及其配伍对IR 3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗的影响采用地塞米松诱导IR 3T3-L1细胞模型,将IR 3T3-L1细胞分为模型组及药物干预组(分别给予小檗碱、梓醇、小檗碱+梓醇进行干预),另设正常脂肪细胞作为对照组,用葡萄糖氧化酶法检测培养液中葡萄糖消耗量。第二部分小檗碱与梓醇及其配伍对IR 3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表达的影响收集细胞和培养液上清,采用酶标记免疫吸附测定法(ELISA)检测培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6的分泌水平,以实时定量PCR检测细胞TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA的表达。结果第一部分小檗碱与梓醇及其配伍对IR 3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗的影响IR模型组葡萄糖的消耗量较正常对照组显著减少(P<0.01);与模型组相比,小檗碱组、梓醇组、小檗碱+梓醇组的葡萄糖消耗量显著增加(P<0.01),小檗碱组和梓醇组之间葡萄糖消耗量差异无统计学意义(P>0.05),梓醇+小檗碱组葡萄糖消耗量高于单药组,差异具有显著性意义(P<0.01)。第二部分小檗碱与梓醇及其配伍对IR 3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表达的影响与对照组相比,模型组TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA的表达显著升高(P<0.01);与模型组相比,小檗碱组、梓醇组、小檗碱+梓醇组的TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA的表达显著下降(P<0.01),梓醇+小檗碱组TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA的表达低于单药组,差异具有显著性意义(P<0.01);小檗碱组与梓醇组间IL-6分泌及mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05),小檗碱组TNF-α、IL-1β分泌及mRNA的表达低于梓醇组,具有显著性差异(P<0.01)。结论1小檗碱、梓醇及其配伍均能增加IR 3T3-L1脂肪细胞的葡萄糖消耗,其中,小檗碱+梓醇组效应优于单药组,初步说明了黄连丸配伍的科学性。2小檗碱和梓醇及其配伍均能降低IR 3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表达水平,梓醇对于TNF-α、IL-1β表达和分泌影响作用不如小檗碱明显,小檗碱和梓醇各自对IR3T3-L1脂肪细胞IL-6表达和分泌的影响没显著差异。小檗碱与梓醇配伍后,IR3T3-L1脂肪细胞TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表达比单药组有显著下降,提示配伍组对细胞炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6分泌及mRNA表达的影响具有协同作用。