Th细胞免疫与结核性胸膜炎胸膜粘连关系的研究

来源 :汕头大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fengjikun
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目的分析比较结核性胸膜炎包裹、游离胸腔积液的胸液Th1/Th2细胞免疫以及临床特点,探讨结核性胸膜炎发生胸膜粘连的影响因素。研究对象与方法结核性胸膜炎胸液标本44例,其中包裹性胸腔积液23例(包裹组),游离胸腔积液21例(游离组)。以及恶性胸腔积液22例(恶性组)作对照。以双抗体夹心ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay,酶联免疫吸附反应)方法测定各组病例胸液的IFN-γ、IL-4浓度。(1)取包被有抗人IFN-γ或人IL-4单克隆抗体微量板条,留一空白孔,余孔分别加入系列浓度的重组人IFN-γ(或IL-4)标准液、复溶胸液标本各100μl,封闭板条,37℃温箱温育3小时,洗涤5次。(2)加入100μl生物素-IFN-γ(或IL-4)单克隆抗体工作液,封闭条板,37℃温箱温育60分钟,洗涤5次。(3)加入100μl亲合素-酶工作液,37℃温箱温育30分钟(IL-4反应板条60分钟),洗涤5次。(4)加入100μl显色剂,避光,37℃显色15分钟。(5)加入100ll终止液,混匀后即用芬兰产353型酶标仪在450nm处测定各孔溶液的吸光度(OD)值。以标准浓度为横轴,相应吸光度(OD)值为纵轴,制作标准曲线,从标准曲线获得对应各样本OD值的细胞因子浓度值。当标本OD值超过标准曲线OD值上限时,对标本作适度稀释并重新测定,稀释后的标本浓度值乘以相应的稀释倍数即为实际浓度。比较结核性胸膜炎与对照组恶性胸腔积液的胸液IFN-γ、IL-4浓度;比较结核性胸膜炎包裹组与游离组的胸液IFN-γ、IL-4浓度;比较结核性胸膜炎病程小于1月病例与病程大于1月病例胸液IFN-γ、IL-4浓度;分别比较结核性胸膜炎病程1月以内包裹组与游离组、病程1月以后包裹组与游离组的胸液IFN-γ、IL-4水平。分析各组病例的临床症状特点;分析各组病例胸液细胞数、蛋白浓度、乳酸脱氢酶(LDH)浓度。结果1.胸液IFN-γ浓度结核组胸液IFN-γ浓度1238.7±807.2pg/ml,中位数1211.00pg/ml,显著高于对照组恶性组(87.8±64.8pg/ml,中位数74.9pg/ml)(P<0.01)。如果不考虑病程因素,结核性胸膜炎包裹组胸液IFN-γ平均浓度1477.69pg/ml,游离组胸液IFN-γ平均浓度977.00pg/ml,二组间无统计学差异(P>0.05)。结核性胸膜炎病程小于1月病例胸液IFN-γ平均浓度1536.14pg/ml,显著高于病程大于1月病例(平均766.35pg/ml)(P<0.01)。病程1月以内包裹组胸液IFN-γ平均浓度1961.91pg/ml,显著高于相应游离组(1140.79pg/ml)(P<0.01)。病程1月以后包裹组胸液IFN-γ平均浓度848.20pg/ml,游离组649.43pg/ml,二间差别无统计学意义(P>0.05)。2.胸液IL-4浓度胸液IL-4在各组平均浓度分别为:结核组55.96pg/ml,恶性组53.68pg/ml;结核性胸膜炎包裹组54.20pg/ml,游离组57.89pg/ml;病程小于1月病例53.33pg/ml,病程大于1月病例60.14pg/ml:病程1月以内包裹组52.87pg/ml,游离组53.76pg/ml:病程1月以后包裹组55.94pg/ml,游离组66.15pg/ml。以上各组间均未发现显著性差异(P>0.05)。3.临床特点结核组平均年龄36.8岁,恶性组62.7岁,二组间差别有高度统计学意义(P<0.01)。结核组发热的发生率77.3%,恶性组为13.64%,差别有高度统计学意义(P<0.01)。结核组胸液平均细胞数2494.6×10~6/L,平均蛋白浓度49.2 g/L,平均LDH浓度322.4 U/L;恶性组胸液平均细胞数2226.5×10~6/L,平均蛋白浓度43.6 g/L,平均LDH浓度433.1 U/L。二组间细胞数、蛋白、LDH浓度等差别均无统计学意义(P>0.05)。44例结核性胸膜炎病例中发热34例(77.3%),包裹组发生率82.61%,游离组71.43%;盗汗14例(31.8%),包裹组34.78%,游离组28.57%;气促34例(77.3%),包裹组73.91,游离组71.43%;胸痛34例(77.3%),包裹组82.61%,游离组71.43%。以上症状在包裹组与游离组之间均未发现统计学差异(P>0.05)。病程1月以后就诊病例,胸膜粘连发生率58.82%,病程1月以内者为48.15%,但二者差别无统计学意义,而这可能与样本量不足有关。包裹组胸液平均细胞数2324.3×10~6/L,平均蛋白浓度48.0 g/L,平均LDH浓度288.1 U/L;游离组胸液平均细胞数2681.0×10~6/L,平均蛋白浓度50.5 g/L,平均LDH浓度360.0 U/L。以上指标在二组间均无统计学差异(P>0.05)。结论结核性胸膜炎局部Th1免疫增强,这在病程早期尤其明显,这种增强的Th1免疫呈动态变化,随着病情的好转有逐渐下降趋势。Th2免疫在结核性胸膜炎局部无明显变化。病程早期剧烈的Th1免疫虽然有利于结核杆菌的清除,但可促成胸膜粘连,因此早期诊治特别重要。胸液IFN-γ水平可作为一个良好的指标用于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液的鉴别诊断:若胸液IFN-γ水平显著升高则强烈支持结核性胸膜炎的诊断,反之则支持恶性胸腔积液。结核性胸膜炎多发于青壮年,而恶性胸腔积液多发于老年,发病年龄有助于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液的鉴别诊断。胸液常规、生化检查结果对于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液的鉴别诊断意义有限。尽管部分结核性胸膜炎病例临床表现不典型,但发热、胸痛、气促等仍然是结核性胸膜炎的常见症状。其中,发热症状对于结核性胸膜炎与恶性胸腔积液的鉴别诊断有重要参考意义。从临床症状、胸液常规、生化检查结果等角度难于预测结核性胸膜炎是否发生胸膜粘连,但延误诊治可能导致胸膜粘连。
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