乳清蛋白降压肽的制备及其功能研究

来源 :东北林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hqxt2009
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乳清是工业生产干酪及干酪素的副产品,具有丰富的营养价值,同时乳清蛋白中还含有大量的功能性成分。乳清蛋白肽具有ACE抑制活性、抗血栓活性等生物活性,近几年来一直是人们的研究热点。本课题是以乳清蛋白为研究对象,利用复合蛋白酶制备乳清蛋白肽,并进行了纯化及其功能性检验系列研究。本论文使用复合酶水解乳清蛋白制备乳清蛋白降压肽,采用正交实验确定最佳酶解条件。分别研究了酶与底物浓度([E/S])、温度、碱性蛋白酶和胰蛋白酶比例([E1/E2])对ACE抑制率和水解度的影响;通过三因素三水平正交实验确定乳清蛋白的最佳酶解条件:[E/S]为5%,pH为8、温度为45℃、[E1/E2]为5:4、水解时间150min,在此条件下乳清蛋白水解物的ACE抑制率为60.19%,水解度为11.92%。采用超滤和离子交换树脂对乳清蛋白肽进行纯化精制,选用6kDa聚砜类中空纤维超滤膜对乳清蛋白降压肽进行分离提取,研究操作温度、操作压力两个因素变化对分离效果影响。通过试验得出最佳分离条件是:温度为25℃、压力为0.1Pa,在此条件下超滤透过液的ACE抑制率提高了33%;选用阴、阳离子交换树脂对乳清蛋白水解肽和过6kDa超滤膜的透过液进行脱盐,结果表明在流速为50r/min条件下,乳清蛋白水解液和过6kDa超滤膜的透过液,总的氮回收率为81%以上、脱盐率为81%以上、经过脱盐的乳清蛋白水解肽和过6KDa超滤膜的透过液的ACE抑制率几乎没有变化。利用纯化精制后的乳清蛋白水解肽饲喂原发性高血压鼠(SHR),分别测定体重、血压、ACE活性和脏器解剖指标进行功能验证。结果表明,乳清蛋白水解肽能降低血压和ACE活性,与对照组相比有明显的效果;对乳清蛋白水解肽的降血压功能进行12h的监测,发现乳清蛋白水解肽能使血压在第4h降到最低,随后缓慢回升至近似原始血压水平,结果表明,乳清蛋白水解肽的降血压功能具有一定的稳定性;另外对SHR进行脏器解剖,脏器解剖指标证明SHR存在心脏肥大症。试验对SHR饲喂乳清蛋白水解肽阶段体重进行监控,结果表明乳清蛋白水解肽在降低血压和抑制ACE活性功效的同时,对SHR体重不产生影响。
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