三种食用菌的抗烟草花叶病毒(TMV)活性研究

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食用菌是可供人类食用的大型真菌,是人类实践活动中最早认识和利用的一类微生物,具有种类繁多、世代短、生物量大、易培养、分布广和营养成分丰富等特点,可以进行大规模工业化生产,具有较好的应用前景。国内外学者对食用菌营养成分进行了广泛的研究,并且开发利用进展的很快,发现了食用菌含有许多具有独特功能的活性物质,这些活性物质具有抗肿瘤、免疫调节、抗凝血、抗病毒、降血脂等方面的生物活性,近年来人们越来越认识到食用真菌中含有许多独特的功能成分。本文分为三部分,第一部分以香菇菌株L66、平菇菌株99为材料,对其进行菌丝发酵培养液的筛选和培养条件的优化;第二、三部分以酵母抽提物、香菇粗提物和平菇粗提物为材料,分别研究了抗烟草花叶病毒(Tobacco mosaicvirus,TMV)活性和对TMV系统侵染寄主普通烟K326(Nicotiana tabacum CV.,K326)诱导抗病性所产生的影响。(1)通过单因素和正交试验,筛选得到香菇、平菇菌丝最佳发酵培养液和最适培养条件,结论如下:香菇菌株L66菌丝发酵最佳培养基为玉米粉3%、豆饼粉2%、KH2PO4 0.1%、MgSO4·7H2O 0.1%、VB115 mg/L;最适培养条件为:摇床转速200rpm,温度25℃,接种量5%,装液量100mL,培养周期为5d,培养初始pH6。平菇菌株99菌丝发酵最佳培养基为玉米粉2%、豆饼粉1%、KH2PO40.15%、MgSO4·7H2O 0.1%、VB1 5mg/L;最适培养条件为:摇床转速150rpm,温度26℃,接种量9%,装液量100mL,培养周期为6d,培养初始pH6。(2)酵母抽提物、香菇粗提物和平菇粗提物抗烟草花叶病毒(TMV)活性如下:酵母抽提物对TMV的抑制效果及体外钝化效果最好,浓度在5 mg/mL以上时,抑制率与钝化率几乎达到100%;香菇粗提物和平菇粗提物对TMV的抑制效果及体外钝化效果较好,并且比较接近。酵母抽提物、香菇粗提物、平菇粗提物对TMV侵染心叶烟的保护作用一般,在心叶烟上预先作用若干时间后,对TMV仍有一定的抑制效果,但效果并不理想。酵母抽提物对TMV在系统侵染寄主普通烟K326体内的增殖抑制作用相当明显;香菇粗提物、平菇粗提物对TMV在系统侵染寄主普通烟K326体内的增殖抑制作用也表现出较高的增殖抑制活性。(3)酵母抽提物、香菇粗提物和平菇粗提物对奇主普通烟K326诱导抗病性的影响实验得到以下结论:酵母抽提物、香菇粗提物和平菇粗提物处理后,烟草体内POD、PPO、PAL和SOD等酶活性均有不同程度的增强,而膜脂过氧化产物MDA含量则相应降低,它们对叶绿体有所破坏,并且酵母抽提物对叶绿素破坏较大。酵母抽提物能够诱导出14条病程相关蛋白谱带,其中包括阳性对照(病叶)处理组诱导出的8条谱带。酵母抽提物能够诱导出多条烟草POD、PPO两种酶同工酶谱带,且部分谱带颜色较深;香菇粗提物和平菇粗提物对烟草POD、PPO两种酶同工酶也有促进作用,但相对较弱。本部分实验结果可以表明:酵母抽提物、香菇粗提物和平菇粗提物对寄主普通烟K326能够产生一定程度的诱导抗性,从而提高寄主防御TMV侵染能力。
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