磷和钾是保证农作物稳产高产的必需元素，但我国磷资源和可溶性钾矿不足日渐突出。土壤中的磷主要以植酸态、核酸、磷脂等有机磷形式存在，其中植酸磷占土壤有机磷含量的50％-80%;土壤中的钾主要以硅酸盐矿物存在，植酸态磷和矿物钾都不能直接被植物吸收利用。　　 本研究从土壤中筛选出一株具有很高植酸酶酶活的枯草芽孢杆菌XF-8和一株具有高效释钾能力的胶质芽孢杆菌NK102。并以XF-8和NK102为发酵菌株，以脱毒污泥（去除重金属的剩余活性污泥）和麦麸为原料，进行了固态发酵制备微生物菌肥的研究，制备的菌肥活菌数达到国家相关标准的要求。　　 另外，对芽孢杆菌植酸酶的最适反应温度，热稳定性和最适反应pH值进行了研究，实验结果表明，Bacillus subtilis XF-8来源的植酸酶最适反应温度为70℃；50-70℃水浴10min后，酶活基本没有损失，在90℃水浴处理10min后，酶活残留量为42.16%，说明该酶具有良好的热稳定性；该植酸酶在pH7.0-8.0时，催化效率最高，pH9.0时酶的催化效率是pH7.0的67%，表明此酶在中性偏碱的范围内有较强的催化效率。　　 由于野生型枯草芽孢杆菌植酸酶表达和分泌能力较低，我们从枯草芽孢杆菌XF-8中克隆得到中性植酸酶phyC基因，进行了相关研究。首先，根据phyC基因序列特点，将成熟植酸酶基因序列克隆到表达载体pET-30a中，在大肠杆菌BL21中诱导表达，对其诱导时间，诱导温度和产物的可溶性进行了分析。结果表明，IPTG诱导1h后植酸酶就有明显的表达，随着诱导时间的延长，蛋白表达量逐渐增多，诱导3h后，蛋白表达量达到最高；37℃诱导，可溶性和包涵体形式的植酸酶表达量均达到最大，而低温诱导(20℃)，有利于减少包涵体的形成，植酸酶主要以可溶性蛋白的形式存在，但植酸酶在上清中的表达量也较低。为了避免包涵体的形成，提高工程菌株的实际应用能力，本研究对植酸酶基因phyC克隆到硅酸盐细菌Bacillus mucilaginosus NK102中-实现组成型分泌表达进行了研究。　　 胶质芽孢杆菌是一种硅酸盐细菌，能够从土壤中钾矿物中释放可溶性钾，本研究中将去除信号肽序列的phyC基因克隆到芽孢杆菌启动子p43和果聚糖蔗糖酶sacB信号肽下游，然后以Bacillus mucilaginosus NK102的16S rDNA作为同源重组的靶序列，构建打靶载体pCEphyC，目的是将表达盒p43-sacB-phyC整合到NK102染色体中，以期获得一株稳定的解磷解钾工程菌株，用于生物菌肥制备的研究。