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目的： 比较分析细菌培养及荧光PCR法两种不同方法检测痰标本中肺炎克雷伯菌的差异，为临床提供一种快速准确检测肺炎克雷伯菌的方法——荧光PCR法；调查萍乡市人民医院痰标本中肺炎克雷伯菌的超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）检出率以及产ESBLS株的耐药情况，指导临床合理使用抗菌药物。 方法： 对萍乡市人民医院68例疑似肺炎克雷伯菌感染病人采集送检的痰标本，采用细菌培养法及核酸（荧光PCR法）检测，结果进行对比统计分析。同时对荧光PCR法的特异性和灵敏度进行研究。收集萍乡市人民医院2014年7月至12月临床分离肺炎克雷伯菌的169例痰标本，对产ESBLs肺炎克雷伯菌和非产ESBLs肺炎克雷伯菌的药敏结果进行对比分析，了解产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药情况。 结果： 在68例痰标本中肺炎克雷伯菌检出的结果，常规细菌培养法检出阳性33例，阴性35例，阳性率48.53％；荧光PCR法检出阳性49例，阴性19例，阳性率72.06%。对肺炎克雷伯菌标本DNA检测得扩增产物，对非肺炎克雷伯菌无交叉反应，其检测灵敏度为1×103copies/ml。169例检出肺炎克雷伯菌的痰标本中，分离出产ESBLs阳性株76株，其阳性率为44.97%；肺炎克雷伯菌产ESBLs株与非产ESBLs株对14种抗生素耐药情况的比较：两者均为检测对亚胺培南的敏感的菌株，但对其他抗生素产ESBLs株的耐药率均高于非产ESBLs株。 结论： 荧光PCR法检出肺炎克雷伯菌的阳性率高于常规细菌培养法，具有很高的灵敏度和特异性，检测时间短，能为临床诊断提供及时准确的结果。产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药情况严重，但对亚胺培南、美罗培南和哌拉西林/他唑巴坦呈现较高敏感性，可用于经验用药。