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目的肺动脉高压(PAH)的特征性病理变化是肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)异常增殖,导致肺小动脉管腔进行性狭窄,儿童也是发生PAH的主要人群之一。Erk1/2的磷酸化与多种细胞的增殖相关。曲前列环素(Trep)近期已用于治疗PAH,其机制需进一步研究探讨。本研究以PASMCs为研究对象,探讨Trep对PAMSCs增殖的影响及Erk1/2磷酸化水平的变化,旨在探究治疗PAH的新思路。方法复苏PASMCs,显微镜下观察细胞形态,免疫荧光方法鉴定细胞。使用不同浓度的血小板衍生生长因子(PDGF)促进PAMSCs增殖,找到合适浓度的PDGF建立增殖模型。先观察Trep对PAMSCs增殖的影响并检测Erk1/2磷酸化水平,实验分为:对照组,Trep组,PDGF组,PDGF+Trep组。显微镜下观察各组细胞形态,MTT法检测各组细胞活性,Western Blot法检测各组细胞内增殖细胞核抗原(PCNA)、t-Erk1/2及p-Erk1/2蛋白表达;再使用Erk1/2磷酸化抑制剂PD98059代替Trep,重复上述实验,观察PD98059对PAMSCs增殖的影响及Erk1/2磷酸化水平。结果(1)PASMCs复苏后在显微镜下可见细胞呈长梭型,培养皿底部分稀疏,部分密集;荧光显微镜下见细胞内特异性a-SMA被Fitc染成绿色,呈丝状与细胞纵轴平行。证实所用细胞为PASMCs。(2)20ng/L的PDGF处理下,MTT方法示细胞活性最强,Western Blot结果示细胞内PCNA蛋白含量最高。(3)在观察Trep对PAMSCs增殖的影响及Erk1/2磷酸化水平的检测中发现:PDGF组显微镜下见细胞密度大于对照组,细胞形态较对照组饱满,而PDGF+Trep组细胞密度低于PDGF组;MTT法示PDGF组细胞活性高于对照组(P<0.05),PDGF+Trep组细胞活性均低于PDGF组(P<0.05)。Western Blot法结果示PDGF组细胞内PCNA表达量高于对照组,PDGF+Trep组细胞内PCNA表达量低于PDGF组(P<0.05);PDGF组细胞内p-Erk/t-Erk高于相应对照组,PDGF+Trep组细胞内p-Erk/t-Erk低于相应PDGF组(P<0.05)。(4)在观察PD98059对PAMSCs增殖的影响及Erk1/2磷酸化水平的检测中发现:从细胞形态学改变、细胞活性、PCNA蛋白表达及p-Erk1/2与t-Erk1/2比值分析显示:PD98059与Trep具有相似的作用。结论曲前列环素抑制PDGF诱导的PASMCs增殖,其机制可能与改变Erk1/2磷酸化水平有关。