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林丹教授是海南省名中医,国家中医药管理局第五批全国名老中医药专家师承导师之一。工作于海南医学院附属医院中医科,从医、从教30余年。不但理论知识深厚,临床经验丰富,医术精湛,而且医德高尚,为人和蔼可亲,处世宽容豁达,工作一丝不苟,是我们学习及效仿的榜样。三年的跟师学习,不仅感受到了林丹教授的谆谆教诲,学术获益匪浅,更被她高尚的医德、师德以及人品而熏陶。本文主要从三个部分对导师的学术思想和经验进行阐述。第一部分是对林丹教授学术渊源的概述。1.精研经典,旁及各家:林丹教授的学术观点及辨治思想的形成源起《内经》《伤寒论》、《金匮要略》等中医经典著作,尊仲景之辨治体系,旁及张景岳、傅青主、叶天士、吴鞠通、王清任等各家之说。2.汲取现代,创新发展:林丹教授多年来虚心求教,交流经验,汲取现代医学知识,博采近现代诸名医之长,融各家学说于一身,并在实践中不断创新发展,逐渐形成了自身的学术思想和经验。第二部分是对林丹教授学术思想和临床经验的总结。通过跟师随诊学习,记录整理病案,归纳总结出林丹教授的主要学术思想为:1.注重整体观念,强调辨证论治;2.提倡中西合璧,辨病综合治疗;3.宏观微观辨证,倡导病证结合;4.临证顾护脾胃,用药注重气机;5.组方精简便廉,注重养生调护。本研究较系统地梳理总结了林丹教授临证最常诊治的5种疾病,对其临证思维和诊治经验进行了详细论述并附病案举例。1.诊治慢性肝病经验:慢性肝病多为正气亏虚、毒邪入侵、气机郁滞、瘀血阻络所致,病机复杂,多表现为本虚标实、虚实夹杂。临床常见湿热蕴结、肝郁脾虚、肝肾亏损、气滞血瘀等证候。认为慢性肝病的治疗应以清利疏化为常法,温化补益宜变通,实脾护胃贯始终,祛邪勿伤正,养阴不敛邪。且重视辨病辨证相结合与对药的应用。2.诊治胃脘痛经验:认为外邪或脏腑失和导致胃气阻滞,脾胃气机升降失常,胃失通降,不通则痛是胃脘痛的主要病机。胃脘痛的治疗应以理气为要旨,平补而不滞,宜寒温并用、润燥相济、升降相因,勿忘制酸而止痛,久病入络须活血,需衷中参西理,辨证论治,随症加减,通常结合脾胃病的生理病理与药物性味特点来遣方用药。3.诊治咳嗽经验:咳嗽辨证应注重辨疾病、辨外感内伤、辨痰、辨咳、辨兼证。治疗方面,外感致咳以祛邪为要;痰邪为患要治之有法;注重气机宜宣降相因;追溯求本故不忘脾肾。并详细列举、解析其常用治咳之药对。4.诊治抑郁症经验:抑郁症的基本病机为情志过极,引起气机郁滞,进而气血阴阳失调,脏腑功能失常。治疗以精神调摄为要,以理气解郁为先,多脏气血同调,重视睡眠饮食。通常从肝郁气滞、肝郁痰阻、心神失养、心脾两虚、阴虚火旺及肝郁血瘀等证型来论治。5.诊治多囊卵巢综合征经验:多囊卵巢综合征的病因病机以肾脾亏虚为本,肝郁气滞为因,痰湿血瘀为标。治疗以益肾健脾为根本,辨证治疗气滞、血瘀、痰湿、湿热等标证,而且重视调周期治疗。第三部分是对林丹教授经验方“二红降脂汤”治疗非酒精性脂肪肝大鼠的疗效及相关机制的实验研究。目的:通过高脂饲料喂养建立非酒精性脂肪肝(NAFLD)大鼠模型,观察林丹教授经验方“二红降脂汤”对NAFLD模型大鼠一般情况、肝功能、血脂、肝脂、血糖、胰岛素抵抗、瘦素、氧化应激、脂质过氧化损伤及肝组织病理学的影响,探讨二红降脂汤对非酒精性脂肪肝大鼠的疗效及相关机制。方法:选用清洁级雄性SD大鼠48只,体重约140~160g,放入清洁级动物室内饲养。适应性喂养1周后,随机分为2组:正常组10只,高脂组38只。正常组给予普通饲料喂养,高脂组给予高脂饲料(84%普通饲料、1%胆固醇、5%蛋黄粉、10%猪油)喂养,共造模12周,饲养12周末时随机选取正常组及高脂组各2只做肝组织的HE染色,确定造模成功。高脂组剩余大鼠随机分为3组:高脂模型对照组(模型组,n=12)高脂+吡格列酮干预组(西药组,n=12),高脂+二红降脂汤干预组(中药组,n=12),继续予高脂饲料喂养同时每日上午分别给予不同药物灌胃,西药组灌胃吡格列酮片混悬液3mg/kg.d,中药组灌胃二红降脂汤中药煎剂10ml/kg.d,中药液浓度为含生药1.54g/ml。正常组剩余大鼠为正常对照组(正常组,n=8),继续予普通饲料喂养。正常组及模型组均给予等量蒸馏水灌胃。连续灌胃4周,末次给予饲料禁食12h后手术取血,运用全自动血清生化分析仪检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS),计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=FINSxFBG/22.5,血清瘦素(Leptin)水平测定采用放射免疫分析法。取肝脏组织行HE染色,运用光镜观察肝脏病理形态学改变。切取部分肝脏组织,精确称取肝组织0.5g,采用超声匀浆机制成匀浆,检测肝组织匀浆中游离脂肪酸(FFA)、TG含量、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平。结果:1.各组大鼠体重、肝湿重和肝指数的变化模型组大鼠较正常组体重、肝湿重、肝指数均显著增加,存在显著性差异(P<0.05)。而西药组和中药组大鼠体重、肝湿重和肝指数均明显下降,与模型组比较,具有显著性差异(P<0.05)。2.肝脏病理变化肉眼观察模型组肝脏肿大而软,包膜紧张,边缘圆钝,外观呈黄红和灰红相间,表面及切面油腻,组织较脆。光镜观察大鼠肝脏均存在明显肝细胞脂肪变性,小叶内的细胞布满脂肪空泡,小叶中央区受累明显,并可见炎症细胞浸润,肝细胞肿大变圆,胞浆疏松,内含大脂肪滴,细胞核被推挤到细胞一侧,呈现不同程度的水肿变性。提示造模成功。西药组和中药组大鼠肝组织脂肪变性和炎症活动程度明显减轻,与模型组相比,具有显著性差异(P<0.05)。3.血清指标检测结果(1)血脂:模型组大鼠血清TC、TG水平较正常组均显著升高(p<0.01),而西药组和中药组血清TC、TG水平则较模型组明显下降(P<0.05),且中药组在降低血清TC水平方面疗效明显优于西药组(P<0.05)。(2)肝功能:模型组大鼠血清ALT、AST水平较正常组均明显升高(P<0.01),而西药组和中药组血清ALT、AST水平则较模型组明显下降(P<0.05),且中药组在降低血清ALT水平方面疗效明显优于西药组(P<0.05)(3)空腹血糖:模型组大鼠血糖明显升高,与正常组相比,具有显著性差异(p<0.01);而西药组和中药组大鼠的血糖水平均明显下降,与模型组相比,具有显著性差异(p<0.05)。(4)胰岛素:模型组大鼠血清胰岛素水平明显升高,与正常组相比,具有显著性差异(p<0.05);而西药组和中药组大鼠胰岛素水平明显下降,与模型组相比,具有显著性差异(p<0.05)。(5)IR指数:模型组大鼠胰岛素抵抗指数显著升高,与正常组比较,具有显著性差异(p<0.01);而西药组和中药组大鼠胰岛素抵抗指数明显下降,与模型组比较,有显著性差异(p<0.01)。(6)瘦素:模型组大鼠Leptin水平明显升高,与正常组相比,具有显著性差异(P<0.01);而西药组和中药组大鼠血清瘦素水平明显下降,与模型组相比,具有显著性差异(p<0.05)。4.肝组织FFA、TG、MDA、SOD检测结果模型组大鼠肝组织中FFA、TG和MDA水平明显升高,与正常组相比,具有显著性差异(P<0.01),SOD水平明显降低,与正常组相比,也具有显著性差异(P<0.01);而西药组及中药组大鼠肝脏组织中FFA、TG和MDA水平明显降低,与模型组相比,具有显著性差异(P<0.05),两组的SOD水平明显升高,与模型组相比,也具有显著性差异(P<0.05)。且中药组在降低肝组织FFA、TG水平方面疗效明显优于西药组(P<0.05)。结论:1.二红降脂汤能减轻NAFLD大鼠体重和肝湿重,改善NAFLD肝肿大和肝组织病理学,具有一定的减肥作用,通过减轻体重和内脏肥胖达到治疗作用。2.二红降脂汤能降低NAFLD大鼠血清转氨酶,改善肝功能,对肝细胞损害有一定的保护作用。3.二红降脂汤能降低NAFLD大鼠血脂水平,抑制肝内脂质沉积,对脂质代谢具有调节作用。4.二红降脂汤能降低NAFLD大鼠血清Leptin表达,有助于改善瘦素抵抗,减轻肝脏脂肪变性。5.二红降脂汤能降低NAFLD大鼠血糖和血清胰岛素,改善IR,有效阻断NAFLD的发展。6.二红降脂汤能增强NAFLD大鼠血清SOD活性,降低MDA含量,能增强抗氧化损伤能力,减轻氧化应激损伤,保护脂质过氧化,从而阻止炎症坏死及纤维化进程。