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目的：检测Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo在化学诱导小鼠肝癌过程中各个阶段的表达情况及其变化，初步探索该信号通路的调控机制。方法：选取符合标准的C57BL/6J雄性小鼠95只，分为对照组（45只）和诱癌组（50只）。45只对照组小鼠给予常规标准喂养，50只诱癌组小鼠利用DEN/CCl4/Ethanol等化学物质联合诱发小鼠肝癌,观察两组小鼠生长状况，从诱癌第4周开始分别处死一批对照组和诱癌组小鼠，获取小鼠肝组织标本，之后每隔一周（即第6、8、10、12、14、16、18及20周）按期获取对照组和诱癌组小鼠肝组织或肝癌组织标本。对所获取的组织标本施行病理形态学观察，与此同时采用免疫组织化学技术、蛋白质印迹技术以及实时荧光定量PCR技术监测Hedgehog信号通路成员Shh、Ptch和Smo的蛋白以及mRNA的动态表达情况。结果：病理形态学观察显示诱癌组C57BL/6J雄性小鼠在经历了20周的化学刺激后，诱导肝细胞癌获得成功。免疫组织化学检测结果显示，诱癌组Shh蛋白开始出现弱阳性表达是在第6周，中度阳性结果出现在第16周，强阳性表达则出现在第20周；Ptch蛋白在第8周时开始出现弱阳性表达，在第16周时出现中度阳性，在第20周出现强阳性表达；Smo蛋白出现弱阳性、中度阳性和强阳性表达分别是在第10周、第16周和第20周；而正常对照组中未检测出三种蛋白的表达。蛋白质印迹法检测结果显示，诱癌组Shh蛋白从第6周开始、Ptch蛋白从第8周开始、Smo蛋白从第10周开始检测出弱表达条带，随着化学诱癌剂作用时间的延长，三种蛋白的表达量逐渐增多，表达条带逐渐增强增宽，到第20周时可以观察到表达条带显著增强，表达量达到最多，而正常对照组中却未检测出三种蛋白的表达。实时荧光定量PCR技术检测出的结果显示，Shh对照组、Ptch对照组和Smo对照组中Shh mRNA、Ptch mRNA和Smo mRNA的表达在各周期之间的比较，差异均没有统计学意义（P>0.05）；同一基因诱癌组中，三者的表达量均依次呈逐步上升趋势，一直到第20周时三者的表达水平均达到最高，Shh mRNA为15.986±1.784，Ptch mRNA为11.272±0.295，SmomRNA为10.185±0.716，且在Shh诱癌组、Ptch诱癌组和Smo诱癌组中每一组的后一周期小鼠肝组织中各自的表达水平普均遍高于前一周期的表达水平；与其相对应周期的正常对照组比较，诱癌组小鼠肝组织中Shh mRNA和Ptch mRNA表达从第6周开始，Smo mRNA的表达从第8周开始，明显高于同一周期正常对照组，此间差异有统计学意义（P<0.05）。结论：Shh、Ptch和Smo是Hedgehog信号通路的重要成员，三者在本实验的诱癌过程中表达量的显著变化，造成了小鼠肝组织中内环境的变化，从而激活了Hedgehog信号通路，引发小鼠肝细胞癌的形成。Hedgehog信号通路分子Shh、Ptch和Smo协同作用共同参与了小鼠肝癌的发生、发展的整个过程，其表达量随着诱癌周期的不断进展而逐步升高，可以认为Hedgehog信号通路与小鼠肝癌的发生发展有着密不可分的联系。