论文部分内容阅读
鸡球虫病是由艾美尔属(Eimeria)的一种或多种艾美尔球虫引起的一种严重危害养鸡业的广泛性寄生虫病。近年来,随着养鸡集约化、规模化提高,对于鸡球虫病的防治提出更高要求。长期以来,化学药物是防治鸡球虫病的主要手段,因药物的频繁使用,导致球虫耐药性增加,且化学药物残留也给公共卫生带来极大危害。此外,球虫疫苗的研制和应用在生产得到初步应用,但尚存在毒力返强、免疫保护力不足等问题,从而疫苗的使用存在一定的局限性。因此,寻找安全高效防治鸡球虫病成为该领域的研究热点之一。卵黄抗体具有高特异性,且无副作用,在多种疾病的防治中实践中的作用业已证实。由此可见,通过抗球虫的卵黄抗体来防治球虫病可成为该病防控的新途径。本研究利用4种球虫活卵囊免疫蛋鸡,制备其卵黄抗体,将其作为饲料添加剂饲喂球虫感染的雏鸡,以探究卵黄抗体在实际治疗球虫病的效果,为日后在临床上防治该病提供参考依据。1抗球虫四价IgY的制备与鉴定将纯化后的柔嫩、巨型、堆型和早熟艾美耳球虫的活卵囊按照同等比例混合,超声破碎后与佐剂混匀作为免疫原,对180日龄蛋鸡进行肌注免疫,剂量为1×10~5个/只,10 d一免,共免疫5次。产蛋后每隔10 d取蛋分离卵黄,采用水稀释法结果饱和硫酸铵法提取卵黄抗体。通过SDS-PAGE对提纯的IgY进行纯度测定SDS-PAGE分析表明,提纯的卵黄抗体由约66 KDa的重链和约40 KDa的轻链组成,纯度可达95%。2建立间接ELISA方法分析免疫后抗体消长规律柔嫩、堆型、巨型和早熟球虫卵囊经超声破碎,将抗原浓度调整为0.74mg/m L,通过对反应条件的优化,筛选间接ELISA方法的最优条件;对其特异性和敏感性进行分析。同时运用已建立方法评估免疫后抗体消长规律。结果显示抗原最佳稀释度为1:400,;特异性试验证明卵黄抗体能特异性识别球虫抗原。且该方法具有良好的敏感性和重复性;3免后卵黄中抗体水平开始逐渐上升,并在第60 d达到峰值,最高效价达到1:25600,并较长时间之内保持高水平3 IgY在抗鸡球虫病中的效果评估将15日龄白羽肉鸡随机分成9组,分别为白对照组、红对照组、阴性卵黄粉对照组、药物添加组和卵黄粉添加组Ⅰ～Ⅴ,每组15只。从15日龄开始在饲料中添加卵黄抗体,连续6 d,药物添加组接受0.25g/只,连用4 d;在鸡群16日龄时,除白对照组外,其他组别均灌服感染性球虫卵囊1×10~4个/只。分别计算相对增重率、卵囊排出数、盲肠病变和抗球虫指数等为指标,综合评价卵黄抗体治疗鸡球虫感染效果。结果表明,饲喂卵黄抗体后各试验组的平均增重、病变记分、卵囊减少率和ACI等指标均优于感染对照组和阴性对照组。