论文部分内容阅读
第一部分脑源性神经营养因子对左旋多巴诱导帕金森病异动症大鼠的行为学研究目的:建立帕金森病异动症大鼠模型,观察脑源性神经营养因子对左旋多巴诱导的帕金森病异动症大鼠的行为学影响方法:应用脑立体定位注射法在60只SD大鼠右侧前脑束注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)建立单侧损毁的帕金森病(PD)大鼠模型。PD模型大鼠建立成功后随机分为两组分别腹腔注射生理盐水和L-DOPA 21天。在第22天再把两组分别随机分为两组行脑立体定位注射脑源性神经营养因子(BDNF)或生理盐水,形成了4组实验大鼠:生理盐水组、BDNF组、L-DOPA组、L-DOPA+BDNF组。4组大鼠脑立体定位注射后,各组再继续腹腔注射生理盐水或L-DOPA 1周。在治疗的第2、11、21、23、25、29天进行行为学测试。结果:1.与L-DOPA组相比,L-DOPA+BDNF组大鼠在第23、25、29天,轴性异常不自主运动(AIM)评分和口舌异常不自主运动评分显著降低(P<0.01);在治疗的第23、25天,L-DOPA+BDNF组大鼠较L-DOPA组大鼠肢体不自主运动评分显著降低(P<0.01);纹状体注射BDNF没有缩短L-DOPA诱发异常不自主运动的时间,BDNF减少了异常不自主运动的严重程度。2.在第2、11、21天,腹腔注射L-DOPA的实验大鼠在治疗后,毁损对侧前肢跨步数较治疗前显著改善(P<0.01);在第23、25、29天,L-DOPA组和L-DOPA+BDNF组大鼠治疗后较治疗前的毁损对侧前肢跨步数均显著改善(P<0.01);但L-DOPA组和L-DOPA+BDNF组治疗后的跨步数没有明显差异。3.腹腔注射L-DOPA的所有大鼠的旋转反应时间均随着治疗时间延长而减少,L-DOPA+BDNF组大鼠在纹状体注射BDNF后旋转反应时间同样随时间递减。结论:纹状体注射脑源性神经营养因子能改善左旋多巴诱导的帕金森病异动症大鼠的异动行为,但并不影响左旋多巴对帕金森病的运动疗效。第二部分脑源性神经营养因子对帕金森病异动症大鼠纹状体中Trk B受体的影响目的:评价纹状体注射脑源性神经营养因子对异动症大鼠纹状体中酪氨酸激酶受体Trk B和BDNF的转录因子CREB的活性影响,同时观察纹状体注射BDNF对内源性BDNF的影响。方法:建立PD大鼠模型成功后,依次经过腹腔注射L-DOPA和纹状体注射BDNF的方法把实验大鼠共分为4组:生理盐水组、L-DOPA组、BDNF组、L-DOPA+BDNF组。于最后一次给药治疗后,提取纹状体组织,用Western blot技术检测Trk B、CREB蛋白磷酸化水平,用实时定量PCR技术检测BDNF的转录水平。结果:1.纹状体注射BDNF的L-DOPA+BDNF组和BDNF组的大鼠纹状体的Trk B蛋白磷酸化水平较L-DOPA组和生理盐水组增高(P<0.05)。2.纹状体注射BDNF的L-DOPA+BDNF组和BDNF组的大鼠纹状体的CREB蛋白磷酸化水平较L-DOPA组和生理盐水组增高(P<0.05)。3.与生理盐水组比较,L-DOPA组的毁损侧纹状体的BDNF转录水平增高(P<0.05);与L-DOPA组相比,L-DOPA+BDNF组大鼠毁损侧纹状体的BDNF转录水平增高(P<0.05);与生理盐水组相比,BDNF组大鼠毁损侧纹状体的BDNF转录水平增高(P<0.05)。结论:纹状体注射BDNF激活BDNF/Trk B信号通路,上调内源性BDNF的转录水平。