高分子-酶结合物制备方法的研究是发展新型生物催化转化过程及生物传感器等的基础。本文首先综述了现有高分子-酶结合物的制备方法,分析了其中存在的问题,提出了以高分子作为柔性载体连接多种酶的思路。以生物化学分析中广泛应用的酶标抗体辣根过氧化物酶(HRP)-IgG为体系,以葡聚糖(Dex)作为载体,制备Dex-HRP-IgG结合物,其目标是提高HRP/IgG摩尔比,由此提高酶标抗体的检测灵敏度。以Schiff碱反应为途径来合成Dex-HRP-IgG结合物。结果显示:Dex在氧化过程中发生轻微的降解,其产物氧化葡聚糖(oDex)在氨化过程中会发生明显降解,通过条件优化可被控制在允许范围之内;可在适宜条件下氧化HRP的糖链以引入醛基;IgG在氧化过程中会发生严重聚集。通过实验考察了多种合成路线来制备具有高HRP/IgG摩尔比的结合物,其中较优的反应途径如下:首先制备oDex-IgG,将其中的葡聚糖部分进行氨化得到aDex-IgG,其后再与oHRP反应合成aDex-IgG-oHRP。该路线特点是单步反应均有较高的结合效率,aDex-IgG-oHRP给出响应信号值为IgG-HRP的2倍。以葡萄糖氧化酶(GOX)和辣根过氧化物酶(HRP)构建复合催化体系,采用上述合成路线制备了GOX-HRP复合酶催化体系并证实了该反应体系的可行性。上述研究初步显示出采用化学方法构建多酶催化和转化过程的可行性,所获结果为以高分子为骨架构建多酶催化剂和催化过程提供了基础。