目的:探讨白介素-33(Interleukin-33,IL-33)对慢性根尖周炎破骨细胞生成及骨吸收功能的影响,研究IL-33在破骨细胞形成过程中的关键调控和分子机制,并进一步证明IL-33在慢性根尖周炎骨吸收机制中的作用。方法:1、测定IL-33对小鼠前破骨细胞RAW264.7细胞增殖和分化的影响。应用100ng/ml IL-33作用RAW264.7细胞,并于诱导1.5h、3h、6h、1d、2d五个时间点收取细胞,通过流式细胞术检测IL-33作用RAW264.7细胞株后细胞增殖的情况。应用100ng/ml IL-33作用RAW264.7细胞,并于诱导0d、4d、7d三个时间点收取细胞,TRAP染色鉴定IL-33作用RAW264.7细胞株后细胞分化及破骨细胞生成情况。2、研究IL-33对破骨相关因子的基因及蛋白的影响。将RAW264.7分组即分为:A组:空白对照组(只加培养基,不加任何药物),B组:100ng/ml IL-33干预RAW264.7细胞1.5h实验组,C组:100ng/m L IL-33干预RAW264.7细胞3h实验组,D组:100ng/ml IL-33干预RAW264.7细胞6h实验组,并于4个时间点收获细胞,通过实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)和Western-blot方法测定RANKL、NFATc1及TRAP的mRNA及蛋白表达的情况,分析IL-33对破骨相关因子RANKL、NFATc1及TRAP的mRNA及蛋白表达的影响。结果:通过流式细胞仪检测,100ng/ml IL-33作用RAW264.7细胞,细胞增殖受到抑制,并随着100ng/ml IL-33作用时间的增长,S期的分布比例逐渐降低,细胞增殖逐渐减慢。TRAP染色结果显示,用100ng/ml IL-33诱导RAW264.7细胞分化,和对照组比较,在4d和7d均未出现TRAP染色阳性的多核破骨细胞(细胞核≥3个)。RT-qPCR结果发现:TRAP在1.5h组基因表达高于对照组,3h组、6h组基因表达低于对照组。(P<0.05)NFATc1在1.5h组基因表达高于对照组,3h组、6h组基因表达低于对照组。(P<0.05)RANKL在1.5h组基因表达高于对照组,3h组、6h组基因表达低于对照组。(P<0.05)Western-blot结果表明:TRAP在1.5h组和6h组的蛋白表达高于对照组,3h组蛋白表达低于对照组。(P<0.05)NFATc1在1.5h组蛋白表达高于对照组,3h组和6h组蛋白表达低于对照组。(P<0.05)RANKL在1.5h组的蛋白表达高于对照组,3h组和6h组蛋白表达低于对照组。(P<0.05)结论:IL-33抑制破骨细胞生成并且抑制破骨相关因子RANKL、NFATc1及TRAP的mRNA及蛋白表达,IL-33可能通过直接抑制破骨细胞的生成或间接抑制破骨相关因子RANKL、NFATc1、TRAPmRNA及蛋白表达,从而抑制破骨细胞的分化及增殖,进而抑制骨吸收,在慢性根尖周炎骨吸收中发挥保护作用。