沉默信息调节因子2在人骨关节炎软骨组织及细胞中表达的研究

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【研究目的】以人骨关节炎软骨标本研究对象,检测沉默信息调节因子2(SIRT2)在人软骨组织及细胞中的表达分布及表达情况,探讨SIRT2在骨关节炎(OA)与正常软骨组织及细胞中表达的差异性。【研究方法】选取临床中因膝骨关节炎而行全膝关节置换术患者的关节软骨标本20例,为OA组,按照2007年最新骨关节炎诊治指南的OA诊断标准,所有病人术前详细询问病史,无外伤、炎症、关节不稳定、慢性反复劳损或先天性疾病等。选取临床中因股骨颈骨折而行全髋关节置换术患者的关节软骨标本10例,为对照组,患者既往体健,否认既往存在关节疾病病史,此次股骨颈骨折根据患者病史及影像学检测排除OA。对取材关节软骨行免疫荧光染色检测SIRT2在两组软骨组织的表达分布及表达情况。在无菌条件下,分离软骨细胞并进行细胞传代培养,甲苯胺蓝染色进行细胞鉴定。采用Western blot法分别检测软骨组织及细胞中SIRT2的表达情况。【研究结果】免疫荧光染色结果显示SIRT2表达于软骨组织中,分布在细胞核与细胞质中,OA组SIRT2阳性细胞率较对照组明显降低(P<0.01)。甲苯胺蓝染色后倒置显微镜下可见:大部分细胞呈现长梭形和多角形两种形态,细胞长满后排列紧密,细胞核为圆形或者椭圆形,位于胞体中心,细胞外基质均匀,被染成异染的蓝紫色,证实确为本实验所需关节软骨细胞。Western blot结果显示OA组软骨组织中SIRT2表达水平显著低于对照组(P<0.01),软骨细胞中SIRT2的表达水平亦显著低于对照组(P<0.01)。【结论】SIRT2在人类软骨组织中有表达,具体表达在细胞核与细胞质中,SIRT2表达降低可能导致骨关节炎的发生及进展。
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