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鸭疫里氏杆菌(Riemerella anatipestifer, RA)是鸭传染性浆膜炎的病原菌，主要侵染2～8周龄雏鸭，对养鸭业危害十分严重。RA有21个血清型，各血清型之间缺乏交叉保护能力。目前，对RA的防控主要依靠抗生素，但RA对抗生素易产生耐药性，临床防治效果不佳。对RA的诊断主要依靠血清学诊断，费时费力。鉴于此，本论文建立了用分子生物学技术快速确诊RA的方法，并采用纸片扩散法检测RA对抗菌药物的敏感性，旨在为快速诊断和临床防治RA病提供科学依据。经对浙江省临安市横畈麻鸭养殖场发病雏鸭致病菌进行分离培养、生理生化鉴定，获得14株符合RA生物学特性的分离株。基于RA的16S rRNA基因保守序列设计引物，建立PCR法对RA进行诊断。结果6株标准株RA、14株临床分离疑似RA能扩增出698bp的特异性条带，而鸭大肠杆菌(Escherichia coli)和鸭沙门氏菌(Salmonella)未能扩增出特异性条带。测序结果分析显示，与NCBI上RA菌株相应片段相似性达99.9%。利用这对引物以RA不同稀释度菌液为模板进行PCR敏感度检测，最小检出量为2.3×10~3CFU/mL。用该法对鸭场随机送检的10只病死鸭组织(肝脏、脑、心血、脾、肠、肌肉)的诊断研究发现：脑组织中RA检出率最高，其次为心血、肝脏和脾，肠和肌肉未检出。PCR法的检出率为90%，细菌分离鉴定检出率为70%， PCR法检出率比细菌分离鉴定检出率高20%。研究结果表明：基于16S rRNA基因序列的PCR检测方法在RA诊断中具有特异、灵敏和快速的优点。使用9种常用抗生素和中药黄连汤(由黄连、黄柏、甘草组成的复方汤剂)，以纸片扩散法对RA进行抑菌试验，发现RA对黄连汤、诺氟沙星和氯霉素高度敏感，其敏感度相对应的为100%、95%和90%；对头孢拉定、新霉素和四环素中度敏感，中度敏感率分别为90%、85%和80%；对卡那霉素、链霉素、庆大霉素、氨苄西林耐药性很强，其耐药率相应为100%、85%、80%和65%。建议临床防治RA病时，宜首先采用中药，不仅防治效果良好，还能减少细菌耐药性发生，降低抗生素使用量，提高鸭产品品质。