肺腺癌细胞总RNA转染树突状细胞诱导特异性CTL的体内抗肿瘤效应研究

来源 :安徽医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tangroo
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:针对肺腺癌缺少已知肿瘤抗原和晚期患者肿瘤组织来源困难两大难题,利用建系的肿瘤细胞株与活体组织肿瘤细胞有共享肿瘤抗原的特点,自行构建RNA-DCs疫苗,诱导产生肺腺癌抗原特异性的细胞毒T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocytes,CTLs),探讨其对肺腺癌移植瘤裸鼠的抗肿瘤作用。方法:(1)从外周血单个核细胞(PBMCs)中诱导产生DCs,提取人肺腺癌细胞株A549总RNA电转染DCs,转染后的DCs与自体T淋巴细胞混合培养,诱导产生人肺腺癌抗原特异性的CTL(RNA-DCs-CTL)。(2)实验分为转染RNA的DCs组(RNA-DCs)、转染PBS的DCs组(PBS-DCs)和未转染DCs组(N-DCs),流式细胞术(FCM)测定混合淋巴细胞培养后不同组别CD8+T细胞比例,RT-PCR证明总RNA转染效率,3H-TdR掺入检测T细胞增殖指数以及乳酸脱氢酶(LDH)释放法测定杀伤肿瘤活性。(3)建立肺腺癌细胞株A549荷瘤裸鼠模型,过继回输混合培养后的T细胞,比较不同组别肿瘤体积的差异,计算抑瘤率,免疫组化法检测移植瘤组织中Bax、Bcl-2、COX-2和VEGF的表达,并用全自动图像分析系统分析其平均光密度值(mean optical density, MOD)。结果:(1) RNA-DCs和自体T细胞共培养后CD8+T细胞大量增殖,与PBS-DCs和N-DCs组相比差异显著(P<0.05)。(2) RT-PCR证明电穿孔法可成功使A549的总RNA转染入DCs并可使DCs表达肿瘤抗原。(3) RNA-DCs可显著刺激自体T淋巴细胞增殖,并且诱导产生肿瘤特异性CTLs,对A549细胞产生特异性杀伤作用,而PBS转染组与未转染组则无明显作用(P<0.05)。3H-TdR液闪法测得各组的cpm值分别为:阳性对照组(ConA+T细胞):17105±130,RNA-DCs组:7759±493,PBS-DCs组:2611±161, N-DCs组:2248±332,差异有统计学意义(P<0.05);(3)成功建立肺腺癌裸鼠移植瘤模型。过继回输RNA-DCs-CTL组裸鼠荷瘤体积明显小于回输PBS-DCs-T和N-DCs-T组(P<0.05),抑瘤率分别为68.53%和8.62%;(4)RNA-DCs-CTL治疗后,肿瘤组织Bax的表达显著上调,COX-2、Bcl-2和VEGF的表达显著下调。结论:1.人肺腺癌细胞细胞株A549总RNA转染DCs诱导产生的抗原特异性CTL(A549-RNA-DCs-CTL)对肺腺癌细胞裸鼠移植瘤的生长具有明显的抑制作用。2.除了细胞毒性作用外,A549-RNA-DCs-CTL的抗肿瘤作用可能与诱导肿瘤细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关。
其他文献
桥梁是公路或铁路等生命线中重要组成部分,是关键性枢纽。在地震发生时桥梁往往最易损坏,例如2010年中国青海玉树7.9级地震,2011年日本福岛9.0级地震等,桥梁破坏倒塌的案例随
介绍了除草剂乙草胺的性质、特征及在环境中的行为。同时指出,做为旱田优良除草剂品种之一的乙草胺在水田应用上有着广阔的前景。
目的:探讨小骨窗微创手术对脑出血患者的临床疗效.方法:选取2017年2月~2018年2月本院58例脑出血患者为研究对象,依据治疗方案不同分为对照组和观察组,对照组用常规钻孔置管血
炼油厂的生产排产涉及到具有不同时间尺度的业务过程、经济模型和约束,实际规模的排产模型难以在合理时间内得到求解,并且传统模型的优化目标对方案执行的灵活性和稳定性没有
目的:研究黄荆子乙酸乙酯提取物(VB2)对人类绒毛膜癌JEG-3细胞体外增殖与凋亡活性,及对mTOR/4EBP1mRNA表达的影响。方法:用MTT法检测不同浓度的VB2在不同作用时间下对JEG-3细胞
琉璃苣油因富含γ-亚麻酸和多不饱和脂肪酸而被广泛应用于食品、医药和化妆品等领域。然而,高含量的多不饱和脂肪酸致使琉璃苣油易氧化酸败,且脂溶性功能活性成分难以溶于水溶液中,极大的限制了琉璃苣油的应用范围。功能性油脂微胶囊化可有效解决这一难题,延缓琉璃苣油的氧化速率,减少其在工业生产过程中的营养损失的同时,扩展琉璃苣油的应用范围。本论文选取三组不同的壁材配方对琉璃苣油进行微胶囊化,对其基本理化性质、稳
<正>中国已经进入无"正装"时代。这不是危言耸听。相信很多人都有过相同的经历和感受,那就是每参加一些正式公共活动时,都会接到主办方的通知曰"请着正装"。但什么是正装?在
2007年6月7、8、9日,由首都师范大学音乐学院出品的大型舞剧《白鹿原》在北京保利剧院公演。6月8日,在首都师大国际文化交流中心举办了包括主创代表在内近30人参加的“大型舞
近年来,高校教学改革风起云涌,硕果累累.这种改革使高校教学进一步贴近经济形势与社会生活;并且也使高校教学内容更为丰富深刻,教学功能也得到增强,从而使高校教学形势显示出