β-葡萄糖苷酶，又称β-D-葡萄糖苷水解酶（EC3.2.2.21），能特异性地催化低聚糖（通常2-6个单糖残基），烷基和芳香族烃基末端非还原性的β-D-葡萄糖苷键的水解。本文详细介绍了来源于木薯（Manihot esculenta）的β-葡萄糖苷酶的理化性质、催化反应机制、酶活性测定方法。概述了巴斯德毕赤酵母表达系统的结构、特点及近年来的发展和应用现状。近年来，随着表达系统的发展与完善，已有多种β-葡萄糖苷酶在巴斯德毕赤酵母中得到成功表达。本实验通过PCR扩增的方法获得木薯（Cassava）来源的β-葡萄糖苷酶基因（mebgl），利用毕赤酵母胞外分泌表达载体pPICZαA，成功构建了木薯β-葡萄糖苷酶（mebgl）重组毕赤酵母工程菌，成功实现了木薯β-葡萄糖苷酶（mebgl）的分泌表达。筛选得到展示型重组毕赤酵母菌株GS115/pKMEBGL-GCW12，对其进行免疫荧光分析后发现MEBGL成功展示在毕赤酵母细胞表面。研究结果表明：1）木薯β-葡萄糖苷酶（mebgl）能成功在毕赤酵母表达并分泌到发酵液中，之后，对木薯β-葡萄糖苷酶进行酶学性质研究：SDS-PAGE分析表明，重组蛋白分子量集中在约70kDa左右；在研究温度和pH对该酶水解活力的影响时，该酶的最适反应温度为35℃，最适pH为6.0；2）木薯β-葡萄糖苷酶（mebgl）能成功展示在毕赤酵母细胞表面，最适温度为35℃，最适pH为7.0；3）以pNPG、葡萄糖、纤维二糖和龙胆二糖为底物，利用细胞表面MEBGL的全细胞催化剂进行转糖苷反应合成正辛基葡萄糖苷，结果表明木薯β-葡萄糖苷酶不能利用单糖或者二糖合成烷基糖苷，但能较好地利用糖苷类物质进行转糖苷反应，合成烷基糖苷。