究背景及目的射频消融术现已成为恶性仲瘤局部治疗的有效的手段之一。尤其对于失去外科手术指征的原发性肝癌和继发性肝癌(以下统称肝癌)的局部治疗具有不可替代的作用。但研究报告显示，肝癌射频消融治疗单次完全坏死率仅为50％～93％，残瘤复发率为10¨o％。因此，有必要对肝癌射频消融后残瘤细胞活性的变化规律进一步研究和探讨。在射频治疗的过程中，电极和电极周围会出现不同程度的结痂或炭化现象，导致电阻抗增高，透热性降低；同时，由于肝癌富含动咏血供，RFA时这些动咏可产生明显的热沉降效直，对周围癌组织起保护作用。且越靠近仲瘤周边，血供越丰富，热量越不容易积聚。因此，可以推测：在射频靶区的不同区带，仲瘤细胞的损伤形式和程度有可能不同。本实验研究射频消融对兔肝vx2仲瘤射频靶区内不同区带仲瘤细胞凋亡、增殖的影响，以利于在肝癌射频治疗中获得足够的“安全边界”，减少射频治疗后仲瘤复发和转移的风险，为临床提高肝癌射频治疗的效果提供理论依据。材料与方法对健康清洁新西兰大白兔行开腹肝左叶深处种植vx2仲瘤组织建立vx2肝癌模型。分别于接种后第14天后开始行肝脏cT平扫及双期增强扫描后，将种植成功的48只肝内仲瘤直径约2．5 cm的实验兔随机分为两组：对照组6只，处死后取组织待病理检测；实验组42只，进行开腹下射频消融治疗(消融条件：电压50 v，治疗时间12 min)，并分别于术后即刻、24 h、48 h、1 w、2 w、3 w共6个时间段处死(n一7)。治疗组根据残瘤大体病理标本取靶区中针道炭化区、热凝固区、充血出血区(消融边界区)内组织分三份分别置入10％福尔马林、70％预冷冰乙醇、液氮罐内保存，后行HE染色、Annexin V_FITc／PI标记(流式细胞术、荧光显微镜)及PcNAmRNA表达检测(逆转录PcR)，同时观察腹腔内、肺转移情况。对照组取瘤体组织行上述病理检测。分忻瘤体经过RFA消融治疗后，靶区内组织细胞活性变化特点。结果1．兔vx2肝仲瘤病灶消融早期大体病理标本明显呈现三个区带，即针道炭化区、热凝固区、充血出血带(消融边界区)；光镜下示针道区及热凝固区内大量仲瘤细胞正常形态轮廓消失，出现核固缩、核溶解、核碎裂等；充血出血区内可见大量中性粒细胞、巨噬细胞浸润；随着时间变化三个区带界限逐渐变模糊，针道周围消融区带内坏死组织呈灰色，周围纤维组织逐渐增生；各期消融灶周边区域均可见残存仲瘤细胞。2．A1]1]exin V_HTc／PI染色流式细胞仪检测及荧光显微镜观察发现：残瘤内仲瘤细胞出现大量凋亡及坏死；其中坏死以针道炭化区为主，术后即刻组即呈强阳性(P<0．01)；凋亡细胞以充血出血区为主，24h后达到峰值(尸l<0．01)；3w后凋亡百分率下降，但针道区仍稍高于对照组(P<0．05)。3．PcNAmRNA表达R_r_PcR检测结果：RFA消融瘤体24h后PcNAmRNA表达明显受到抑制；并以针道区为主，且3w内持续低表达(尸l<0．01)；热凝固区及充血出血区(消融边界区带)残余仲瘤细胞PcNAmRNA表达分别于3w内逐渐恢复至对照组水平，其中边界区带3w时表达量超过对照组(尸l<0．05)。结论1．射频消融治疗能够对靶区内肝脏恶性仲瘤细胞产生一定损伤，主要以凝固性坏死为主，同时可以诱导残瘤组织细胞凋亡，以仲瘤周边区带为主，在整个消融区带内一定时间内呈持续性；2．射频消融可以在短时间内抑制肝脏恶性仲瘤的增殖能力，但在第三周残留周围组织细胞增殖能力仍可以恢复到术前状态，甚至有超过术前增殖能力倾向。