氯霉素(chloramphenicol,CAP)在食品中的残留导致了许多恶性疾病,并对人体产生严重危害。美国、加拿大、欧盟和中国等许多国家规定了CAP在所有食品动物的可食用组织中不得检出,所以建立一种高灵敏的检测方法十分必要。时间分辨荧光免疫分析方法(Time-resolved fluoroimmunoassay,TRFIA)是近十年发展起来的一种新兴的非放射性免疫标记技术,具有灵敏度高、特异性强、重复性好等优点,并且非常适合大规模样品的筛选。本论文旨在建立高灵敏的、快速检测CAP时间分辨荧光免疫分析方法(CAP-TRFIA)。将CAP与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联制备免疫抗原与包被抗原,以CAP-BSA免疫新西兰大白兔制备CAP多克隆抗体,以CAP-OVA包被96孔板为固相抗原,与CAP标准品(游离抗原)竞争结合CAP抗体,用稀土离子Eu3+标记的羊抗兔抗体进行示踪,建立起间接竞争CAP-TRFIA检测方法。该方法的灵敏度为0.008ng/ml (8ppt),测量范围0.008 ng/ml ~100ng/ml,不同时间进行的CAP-TRFIA的效应点值ED20、ED50、ED80分别为(25.75±0.442 ng/ml、(0.917±0.081) ng/ml、(0.033±0.0016) ng/ml。批内变异系数6.8%,批间变异系数13.5%。与琥珀酸氯霉素的交叉反应率为19.28%,与甲砜霉素的交叉反应率小于0.1%,与青霉素、诺氟沙星的交叉反应率小于0.01%。牛奶、蜂蜜、虾和鸡肉样品的平均回收率分别为79.7%、112.6%、92.1%和97.1%。考核方法的热稳定性显示有效期应在六个月以上。相比较,酶联免疫吸附检测法(Enzyme-Linked Immuno Sorbent Assay,ELISA)试剂盒的灵敏度是0.05 ng/ml,TRFIA有明显提高。由于酶受温度、pH等各因素的影响,ELISA试剂盒也存在稳定性差,易产生假阳性等诸多问题。研究表明,CAP-TRFIA是目前报导的CAP检测中最灵敏的方法,具有很好的应用前景。