【摘 要】
：
脂肪酶因具有高效的催化活性、底物特异性、功能多样性等特点,被广泛应用到各行各业中。目前,关于耐热脂肪酶报道相对较少,且商业脂肪酶价格昂贵,品种稀缺,限制了脂肪酶的应用范围。为获得耐热性质的脂肪酶,本研究合成了古细菌嗜热玫瑰红球菌的预测脂肪酶基因,利用基因工程技术在大肠杆菌中异源表达耐热脂肪酶,主要研究内容和结果如下:(1)构建了四个表达载体,分别为大肠杆菌来源的分子伴侣硫氧还蛋白与脂肪酶共表达载体
论文部分内容阅读
脂肪酶因具有高效的催化活性、底物特异性、功能多样性等特点,被广泛应用到各行各业中。目前,关于耐热脂肪酶报道相对较少,且商业脂肪酶价格昂贵,品种稀缺,限制了脂肪酶的应用范围。为获得耐热性质的脂肪酶,本研究合成了古细菌嗜热玫瑰红球菌的预测脂肪酶基因,利用基因工程技术在大肠杆菌中异源表达耐热脂肪酶,主要研究内容和结果如下:(1)构建了四个表达载体,分别为大肠杆菌来源的分子伴侣硫氧还蛋白与脂肪酶共表达载体p TIG-li P和p ET32a-li P、融合表达载体p TIG-li P’和p ET32a-li
其他文献
丙酮酸(pyruvic acid)是一种重要的有机酸,也是细胞代谢过程中的关键中间产物,在化工、制药和食品等领域中有着广泛的应用。目前丙酮酸的生产方法主要有化学合成法、微生物发酵法、酶转化法和全细胞催化法。其中,化学合成法对环境污染严重,微生物发酵法中产物组分复杂难以分离,酶转化法的成本较高不易于大规模生产,而全细胞催化法具有环境污染小、底物转化率高、产物易分离等优势,因此,该法合成丙酮酸具有广阔
褐藻胶是含量最丰富的褐藻多糖,是褐藻的主要结构组成。褐藻寡糖安全无毒,具有促进植物种子萌发、抑制致病菌、降血压、抗氧化等功能,目前已被广泛应用于肥料、饲料、保健品和医药等领域中。微生物酶法制备褐藻寡糖是利用微生物所产的褐藻胶裂解酶降解褐藻胶制备褐藻寡糖。然而野生菌所产的褐藻胶裂解酶具有稳定性差、酶活低、降解效率低等缺陷,工业化生产难度大。本课题首先分离筛选了一株产褐藻胶裂解酶的菌株,并利用该菌株定
熊果酸作为重要的乌苏烷型五环三萜,具有抗癌、抗糖尿病、抗溃疡以及降血脂的作用;白桦脂酸作为羽扇豆烷型五环三萜的代表,不仅具有较高选择性的抗黑色素瘤活性,还有出色的抗HIV活性;摩尔酸作为齐墩果烷型五环三萜,具有细胞毒性、抗HIV、抗HSV、抗炎和抗糖尿病等多种药理特性。但是这类化合物结构复杂,难以实现化学合成。目前,主要通过从植物中提取的方式来制备。本研究基于合成生物学策略,通过CRISPR/Ca
脂肪酸乙酯(fatty acid ethyl ester,FAEE)是新世纪以来最具有潜力的新型能源,微生物细胞工厂生产FAEE相较于目前普遍的化学合成方法具有诸多优势,例如对环境污染小,生产成本低等。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)具有高产乙醇和脂肪酰辅酶A的潜力,是构建高产FAEE细胞工厂的重要底盘细胞。本文利用代谢工程手段理性改造酿酒酵母细胞,构建了高效合成FAE
染料脱色过氧化物酶(Dy Ps)属于一种以血红素为辅基的新型过氧化物酶超家族。因为其能够降解蒽醌类染料,Dy Ps成为当今绿色经济的研究热点,而染料的有效降解与酶活性密切相关,因此寻求提高酶活的方法是Dy Ps后续应用的关键所在。本论文将经优化的细菌红球菌(Rhodococcus jostii)RhDypB基因,在E.coli BL21(DE3)中进行了异源表达得到重组蛋白,并开展了相应的基础应用
细菌纤维素(Bacterial cellulose,BC)具有较高的比表面积和孔隙率,良好的成膜性和机械性能,优异的可降解性和生物相容性,在纤维基可穿戴材料,压力传感器组件方面具有广泛的应用空间。本文以三氯化铁(Fe Cl_3)为氧化剂,采用原位聚合法在细菌纤维素分散液中合成聚吡咯(Polypyrrole,PPy)分别通过抽滤、冷冻干燥工艺构筑新型细菌纤维素/聚吡咯导电膜和细菌纤维素/聚吡咯复合网
作为一种高附加价值的稳定剂和保护剂,四氢嘧啶在酶工业、化妆品和生物医药等领域应用广泛,可由一些中度嗜盐微生物天然合成,但需要高浓度盐激诱导。本研究在大肠杆菌(Escherichia coli)中异源构建四氢嘧啶合成途径,并对其进行理性代谢工程改造,构建了一株以发酵温度控制四氢嘧啶合成的高产菌株。(1)以高拷贝表达质粒pFT28为载体,在大肠杆菌MG1655中异源表达来自伸长盐单胞菌(Halomon
生物质资源分布广泛、储量丰富,常采用酶法降解的方式提高其利用率,同时该方法也可生产发酵糖、生物乙醇或高附加值产物。作为高附加值产物之一,阿魏酸是一种天然抗氧化剂,在治疗阿尔兹海默症、糖尿病、心脑血管疾病等方面有重要作用。阿魏酸酯酶能催化阿魏酸与多糖、木质素间的化学键断裂,从而释放阿魏酸,是降解生物质并生产阿魏酸的关键酶。但目前阿魏酸酯酶的低酶活力等缺点限制了其应用,因此获得产酶活力高的菌株是研究关
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON)也称为呕吐毒素,是小麦赤霉病病原菌禾谷镰刀菌产生的代谢产物,可污染包括小麦,大麦,燕麦,黑麦和玉米等在内的主要农作物,并出现在面条和啤酒等食品中;发生率高,不易被降解,且具有多种毒性,一旦产生将通过食物链传递,对人体和动物的健康均产生巨大威胁。通过细胞毒性实验研究细胞在DON刺激下引发的生物标志物变化,对探究其作用机理,评估DON与毒性间的
花生粕作为花生榨油的副产物,是一种重要的蛋白饲料原料,但由于氨基酸不平衡,特别是精氨酸与赖氨酸比例严重失衡的问题,且易氧化、难储存,限制了其在动物养殖上的应用。因此,筛选能够高效利用精氨酸且不产生物胺等有害物质的乳酸菌,并将其应用于发酵花生粕,对解决花生粕赖氨酸和精氨酸比例失衡、提高花生粕的营养和功能具有重要的实用价值。从花生粕、浸米水、黄酒发酵液、泡菜发酵液、东北酸菜中初步筛选出乳酸菌,通过改良